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생명과학 보고서_SDS-PAGE & Western blot(아주대 전공실험2)2025.05.161. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질을 분자량에 따라 분리하는 기법으로, 단백질 시료에 SDS를 처리하여 단백질의 3차 구조를 풀어 선형화시킨 후 전기영동을 통해 분리한다. SDS는 단백질에 결합하여 음전하를 띠게 하므로, 단백질은 분자량에 비례하여 양극으로 이동하게 된다. 이를 통해 복잡한 단백질 혼합물을 효과적으로 분리할 수 있다. 2. Western blot Western blot은 특정 단백질의 유무 또는 양을 확인하는 분석 방법이다. 전기영동으로 분리된 단백질을 membrane에 전이시킨 후, 표적 단백질에 특이적...2025.05.16
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단백질의 분리(생화학실험)2025.01.161. 단백질 단백질이란 생화학에서 생물의 몸을 구성하는 고분자 유기 물질이다. 수많은 아미노산의 연결체로 이루어져 있으며, 생물체 내의 구성 성분, 세포 안의 각종 화학반응의 촉매 역할(효소), 항체를 형성하여 면역을 담당하는 등 여러 가지 형태로 중요한 역할을 수행한다. 2. 단백질 추출 단백질을 추출하기 위해서는 버퍼를 넣고 세포나 조직을 깨뜨려줄 필요가 있다. 세포 및 조직을 깨트리는 방법에는 homogenization, sonication, french pressure cell, grinding, glass bead vort...2025.01.16
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혈구 세포 관찰 및 세포 계수 실험2025.01.021. 혈구 세포 관찰 현미경을 이용하여 혈액 내 다양한 혈구 세포를 관찰하고 그 구조적 차이를 통해 세포를 구분하였습니다. 적혈구, 혈소판, 호중구, 림프구, 단핵구 등의 세포를 확인할 수 있었지만 호산구와 호염기구는 관찰하지 못했습니다. 세포 관찰 시 염색 방법과 현미경 배율 등의 한계로 인해 세포의 세부 구조를 자세히 관찰하기 어려웠습니다. 2. 세포 계수 Hemocytometer를 이용하여 살아있는 세포를 계수하는 방법을 실습하였습니다. 조원들 간 세포 계수 결과에 차이가 있었는데, 이는 샘플링, 세포 분포, 관찰자의 주관적 ...2025.01.02
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아주대학교 A+ 생명과학 실험 효소반응2025.01.131. 효소 반응 이번 효소 반응 실험은 온도와 pH에 변화를 주면서 전분 분해효소 아밀라제가 활성화되는 최적의 조건을 찾는 실험을 진행하였다. 효소는 각각 최적의 온도와 pH가 있는데 실험에 사용한 아밀라제의 경우 이론 상 최적의 pH는 6.7~7이고, 알파 아밀라제는 36.5이고 베타 아밀라제는 55~65 이다. 실험 결과 pH와 온도 모두 이론값과 일치하는 것을 알 수 있었다. 다만 85도의 3pH에서도 흡광도가 비교적 큰 값이 나온 것은 실험 과정에서 오류가 발생했을 것으로 추정된다. 2. 아밀라제 아밀라제는 아밀레이스라고도 ...2025.01.13
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Bradford법을 이용한 단백질의 정량 분석2025.01.151. 단백질 정량 분석 실험 목적은 Bradford법을 이용하여 단백질 정량을 하고 Standard curve를 그리는 것입니다. Bradford법은 산성용액에서 Coomassie brilliant blue 염료가 단백질과 결합하여 최대 흡광도가 595 ㎚로 이동하는 원리를 이용합니다. 따라서 595 ㎚에서의 흡광도가 단백질 농도와 비례합니다. 이 방법은 빠르고 비단백질성분들에 의한 방해도 거의 없어 실험실에서 가장 자주 사용하는 단백질 정량법입니다. 2. 단백질 정량의 중요성 단백질 정량은 생화학 실험에서 기본이 되는 과정입니다....2025.01.15
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형광현미경을 이용한 세포주기 분석 실험보고서2025.05.141. 세포주기 세포주기는 세포분열(M)기와 간기(interphase)로 이루어지며, 간기는 G1기, S기, G2기로 나뉜다. 세포주기에는 정지 및 출발 신호에 의해 주기가 조절되는 체크포인트가 존재하며, 이는 세포 분열을 위한 준비 상태를 확인하는 역할을 한다. 2. 간접면역형광현미경 간접면역형광현미경은 항원과 결합하는 1차 항체, 1차 항체와 결합하는 2차 항체를 이용하여 목표 항원을 찾아낼 수 있다. 2차 항체에 형광물질이 표지되어 있어 형광현미경으로 관찰할 수 있다. 3. 노코다졸 노코다졸은 tubulin 소단위에 결합하여 미...2025.05.14
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단백질의 검출2025.01.091. 단백질의 구조 단백질은 탄소(C), 수소(H), 산소(O), 질소(N), 황(S), 인(P)으로 구성되며, 아미노산이 펩티드 결합으로 연결된 폴리펩티드 구조를 가진다. 단백질의 구조는 1차 구조부터 4차 구조까지 있으며, 이에 따라 다양한 기능을 수행한다. 2. 단백질의 정색반응 단백질은 아미노산 잔기 등이 특수한 시약과 반응하여 발색반응을 나타낸다. 뷰렛 반응은 펩티드 결합이 두 개 이상 있는 단백질이 구리 이온과 반응하여 보라색을 띠며, 닌히드린 반응은 아미노산이 닌히드린과 반응하여 다양한 색으로 발색한다. 3. 단백질 검...2025.01.09
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MTT assay를 통한 세포 viability 측정2025.01.051. MTT assay MTT assay는 살아있는 세포에서만 환원 반응이 일어나는 MTT에 의한 세포 대사 활성을 평가하는 방법입니다. 항암제를 투여하지 않은 배지와 농도별로 항암제를 처리한 배지의 UV 흡광도 값을 비교하여 세포의 생존 비율(cell viability)을 계산할 수 있습니다. 실험 결과, DOX의 농도가 증가할수록 세포 생존율이 감소하는 것을 확인할 수 있었습니다. 2. 항암제 독성 평가 항암제를 세포 배양배지에 투여한 후 배양한 암세포는 약제의 농도에 따라서 생존 세포의 비율이 줄어듭니다. MTT assay를 ...2025.01.05
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[건국대학교] 유전체학 RNA_Vaccine 리포트2025.01.151. RNA vaccine의 배경 RNA vaccine의 이론적 배경을 제시한 사람은 카탈린 카리코 박사다. 카리코 박사는 1955년 헝가리 출생이고, RNA를 매개하는 매커니즘을 전문적으로 연구하는 생화학자이다. 그녀는 1970년대부터 mRNA에 흥미를 느끼고 어떻게 mRNA를 이용해 바이러스를 퇴치할 수 있을 것인가에 대해 연구했다. 카리코 박사의 주요 연구로는 RNA 면역성을 억제하는 뉴클레오사이드 수정과정을 발견하며 RNA 매개 면역을 활성화한 연구가 있다. 2. 카탈린 카리코 박사의 성공스토리 카리코 박사는 1980년대 m...2025.01.15
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Lowry-Folin법을 이용한 단백질 정량 (생화학 실험)2025.01.161. 단백질 정량 실험 목적은 Lowry 방법으로 수용액에 녹아 있는 단백질의 양을 정량하는 것입니다. 이를 위해 표준 용액을 이용한 표준 곡선의 작성과 비색정량법을 습득합니다. Lowry 단백질 분석법은 강알칼리 조건에서 구리 이온과 펩타이드 결합의 반응, 그리고 Folin-Ciocalteu 시약과의 반응을 통해 단백질을 정량합니다. 이 방법은 트립토판, 시스테인, 티로신 등의 아미노산과 반응하여 발색되는 원리를 이용합니다. 2. 분광광도법 분광광도법은 물질에 의한 빛의 흡수 현상을 이용하여 화학물질의 양을 정량하는 방법입니다. ...2025.01.16
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