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[생화학실험]단백질 분리정제 및 기능분석 - buffer 만들기2025.05.051. 단백질 분리정제 및 기능분석 이 실험에서는 단백질 분리정제 및 기능분석을 위한 준비 과정으로 buffer를 제조하는 방법을 다룹니다. Buffer는 pH 변화에 영향을 받지 않는 용액으로, 생체반응에서 생성되는 산과 염기를 흡수할 수 있습니다. 실험에서는 1M Tris-HCl (pH 7.4), NaCl, MgSO4 stock solution을 제조하고, 이를 이용해 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만드는 과정을 설명합니다. 또한 pH 미터기 사용법과 주의사항, 그리고 alkaline phosphatase 정...2025.05.05
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양이온 교환 크로마토그래피 (결과+ 예비)레포트2025.01.031. 양이온 교환 크로마토그래피 양이온 교환 크로마토그래피는 음이온이 달려있는 고정상과 양이온화된 시료 간의 정전기적 인력을 이용하여 양이온화된 시료를 분리해내는 방법입니다. 시료의 pH가 등전점보다 낮은 경우 양의 알짜전하가 강해 양이온 교환 크로마토그래피로 분리하기에 유리합니다. 양이온화가 덜 된 시료일수록 빨리 빠져나오고, 양이온화가 많이 될수록 늦게 빠져나옵니다. 양이온 교환 크로마토그래피는 암 치료, 단백질 정제, 도핑 테스트, 섬유 및 제약 산업 등 다양한 분야에서 활용되고 있습니다. 2. 이온 교환 크로마토그래피 이온 ...2025.01.03
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[만점보고서]Plasmid DNA 추출과 DNA 정량 실험보고서2025.01.171. Plasmid DNA 추출 Plasmid DNA는 세균의 세포 내에서 염색체와 별개로 존재하는 자가복제 DNA이다. Plasmid DNA 추출을 위해 Alkaline Lysis 법을 사용하여 세포를 용해시키고 plasmid DNA를 염색체 DNA와 분리한다. 이 과정에서 다양한 buffer를 사용하여 pH 변화를 조절하고 불순물을 제거한다. 2. DNA 정량 Nanodrop 분광광도계를 이용하여 추출한 plasmid DNA의 농도와 순도를 측정한다. 260nm 흡광도로 DNA 농도를 측정하고, 260nm/280nm 및 260n...2025.01.17
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아주대학교 생물학실험1 A+ DNA구조와 추출 보고서2025.04.261. DNA 구조 DNA (Deoxyribonucleic Acid)는 모든 원핵, 진핵 세포 및 많은 바이러스에서 발견되는 복잡한 분자 구조의 유기 화학 물질이다. DNA는 유전되는 특성의 전달을 위해 유전 정보를 암호화한다. DNA의 구성요소인 뉴클레오타이드는 당과 인산 염 그룹에 연결된 질소 함유 단위(염기)를 포함하는 유기 화합물이다. 뉴클레오타이드는 핵산의 구성요소이기 때문에 살아있는 유기체에 매우 중요하다. 2. 플라스미드 플라스미드는 박테리아 염색체와 독립적으로 복제되는 원형 디옥시리보핵산 (DNA) 분자이다. 이것은 박...2025.04.26
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RNA 준비 및 cDNA 합성: 형질도입 방법론2025.11.141. 형질도입(Transfection) 형질도입은 바이러스의 핵산이나 플라스미드 벡터를 정제하여 진핵세포 내에 도입하는 과정이다. 원핵세포에 도입될 경우는 형질전환(transformation)이라 한다. 세포막의 인지질 이중층은 인산기로 인해 음전하를 띠고 있으며, 핵산도 음전하를 가지고 있어 자발적 도입이 어렵다. 따라서 화학적, 물리적, 생물학적 방법을 이용하여 세포막을 통과시킨다. 2. 화학적 형질도입 방법(Reagent-based Method) 화학적 방법으로는 양이온성 지질(cationic lipids), 인산칼슘(calc...2025.11.14
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코로나19 백신의 종류와 특성2025.11.151. 전체 바이러스(Whole virus) 백신 전체 바이러스 백신은 약독화 생백신과 불활성화 백신으로 나뉜다. 약독화 생백신은 약화된 바이러스를 사용하여 강한 면역반응을 유발하지만 면역이 약한 사람에게는 부적합하다. 불활성화 백신은 유전물질이 파괴된 바이러스를 사용하여 더 안전하고 안정적이지만 면역형성이 약하고 부스터샷이 필요할 수 있다. 대표 백신으로는 BBIBP-CorV(시노팜), CoronaVac(시노벡) 등이 있다. 2. 서브유닛(Subunit) 백신 서브유닛 백신은 전체 병원체 대신 정제된 단백질이나 다당류를 사용한다. ...2025.11.15
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SDS PAGE 실험보고서2025.05.041. SDS PAGE SDS PAGE란 Sodium Dodecyl Sulphate -Polyacrylamide Gel Electrophoresis의 줄임말로써, PAGE는 전기영동법을 지칭하는 말로서 사용되기도 하고, 때로는 겔 자체를 지칭하기도 한다. 이를 사용한 전기 영동법 역시 기본적 원리는 한천을 이용한 것과 같다. 허나 폴리아크릴아마이드 겔은 한천 겔에 비해 훨씬 촘촘한 다공성 물질이기 때문에 한천을 이용할 때에 비해 분자량이 작고 크기 차이가 작은 시료들을 분리할 때 이용한다. 따라서 또다른 고분자 물질이지만 핵산에 비해...2025.05.04
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A+ 생화학실험 <3주차. Agarose Gel Electrophoresis> 레포트2025.01.201. 겔 전기영동 겔 전기영동은 분자의 크기나 전하에 따라 DNA, RNA, 단백질을 비롯한 생물학적 분자들을 분리하는 실험방법 중 하나입니다. 전기영동의 원리는 gel matrix (주로 agarose 혹은 polyacrylamide) 내에 시료를 넣고, 양극과 음극으로 전기장을 가하면 분자들이 전하의 성질에 따라 이동하게 되는 것입니다. 분자의 크기 및 전하밀도에 따라 이동 속도에 차이가 발생하기 때문에, 서로 다른 크기 혹은 전하를 가진 분자들을 분리할 수 있습니다. 겔 전기영동에서 분자의 이동속도에 영향을 미치는 요인에는 입...2025.01.20
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RNA 추출 실험: Guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform 방법2025.11.171. RNA 추출 방법 및 원리 생물 샘플에서 RNA를 추출하기 위해 phase separation을 이용한 Guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction method를 사용했다. 옥수수 잎 조직을 액체질소로 급속 냉각하여 분쇄한 후 Tri-RNA reagent를 첨가하여 세포를 용해시킨다. Chloroform을 첨가하여 원심분리하면 상층의 맑은 aqueous phase에 RNA가 분리되며, isopropanol로 침전시킨 후 70% ethanol로 세척하여 순수한 RNA를 얻는다. ...2025.11.17
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마우스 꼬리로부터 게놈 DNA 추출 및 분석2025.01.041. 게놈 DNA 추출 실험을 통해 마우스 꼬리에서 게놈 DNA를 추출하는 과정을 이해하였습니다. 세포 용해, DNA 정제, 농도 측정 등의 단계를 거쳐 순도 높은 게놈 DNA를 얻을 수 있었습니다. 이 과정에서 주의해야 할 점들, 예를 들어 과도한 tapping이나 오염물질 혼입 등을 확인하였습니다. 2. DNA 전기영동 추출한 게놈 DNA를 아가로스 겔 전기영동을 통해 분석하였습니다. 10,000 bp 이상의 큰 DNA 단편이 가장 뚜렷하게 관찰되었지만 번진 모습(smear)을 보였고, 그 외에도 1,000-2,000 bp 및 ...2025.01.04
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