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Plasmid DNA 정제2025.01.131. 대장균(E. coli) 대장균(E.coli)은 Theodor Esherich의 이름을 따서 발견되어 명명된 박테리아이다. 특징으로는 그람음성의 간균이며, 포자 생성을 하지 않으며, 1-2 microns x 30-30 micron (1 micron = 0.001 mm)크기이고, 섭씨 37도에서 쉽게 자랄 수 있다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA란 세균 속에 주 DNA와 별도로 존재하면서 증식할 수 있는 고리 형태의 DNA로, 원핵생물과 효모 등에서 발견된다. 대장균 세포에서 분리된 Plasmid DNA는 sup...2025.01.13
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Ligation and transformation2025.01.141. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기 서열을 인식하고 절단하는 가수분해 효소이다. 제한효소는 박테리아가 박테리오파지 바이러스로부터 자신을 보호하기 위한 수단이다. 제한효소는 다양한 분류 기준에 의해서 Ⅰ형, Ⅱ형, Ⅲ형으로 나뉜다. 제한효소는 유전자 재조합 외에도 유전자 클로닝, 형질전환 등 여러 가지 생명공학 기술에 널리 활용된다. 2. 플라스미드 DNA 플라스미드 DNA는 주형 DNA와 별도로 박테리아에 존재하는 DNA이다. 플라스미드 DNA는 진정세균뿐만 아니라 고세균이나 진핵생물에도 존재한다. 플라스미드 DNA는 독...2025.01.14
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세균의 형질전환 / bacterial transformation2025.01.121. 유전자 재조합 유전자 재조합은 서로 다른 genome에서 얻은 유전자를 한 세포로 몰아서 돌연변이 없이 새로운 유전형질을 가진 cell을 만드는 과정이다. 유전자 재조합 방법에는 transformation, transduction, conjugation이 있다. Transformation, 즉 형질전환은 세포에 외부 유전자를 인공적으로 도입시켜 숙주세포에 넣어서 세포가 원래의 특성이 아닌 다른 유전형질을 갖도록 하는 것이다. 2. 박테리아의 DNA 흡수 이유 박테리아가 외부 DNA를 흡수하는 이유는 유성생식을 하는 유기체와 다...2025.01.12
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제한효소 절단 실험 결과 분석 및 고찰2025.11.141. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 핵산분해효소로, 유전공학에서 재조합 DNA를 만들기 위해 사용되는 특수한 효소이다. 형태, 절단 위치, 절단 서열의 모양, 조효소 유무에 따라 제1형부터 제5형으로 분류된다. 실험에 사용된 EcoR1은 대장균에서 분리된 제2형 제한효소로, 'GAATTC' 염기서열을 인식하여 절단하며 5'-돌출 점착성 말단을 형성한다. 활성화를 위해서는 pH7.5, 50mM NaCl, 5mM MgCl2, 37°C 조건이 필요하다. 2....2025.11.14
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세포분열과 세포주기: 유사분열과 감수분열2025.11.161. 유사분열(Mitosis) 정상적인 세포분열에 의해 생겨난 두 딸세포는 모세포의 유전형질을 정확히 이등분하여 가진다. 세포질분열 과정에서 원형질 만입 부위에 수축성의 미세섬유가 환을 이루며 능동적인 수축이 주된 기작이다. 연결사가 가느다란 실처럼 남아있다가 세포질 분리가 완전히 이루어진다. 양파 근단 세포에서 전기, 중기, 말기, 후기의 분열 과정을 관찰할 수 있다. 2. 세포주기 조절 진핵세포는 세포내 외부에서 일어나는 스트레스에 반응하여 세포주기 진행을 조절하는 기전을 가지고 있다. 세포가 정상적으로 기능하기 위해서는 세포분...2025.11.16
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생명공학의 분야에 대한 규제, 규제 효과, 역사적사실2025.05.111. 생명공학기술(유전자 및 복제) 및 GMO 생명공학기술(유전자 및 복제) 및 GMO에 대한 윤리적 문제, 위해성, 인체 위해성, 환경위해성이 제기되었다. 이에 따라 각국에서는 생명공학기술의 안전성과 윤리성을 고려하여 관련 법령을 제정하고 있다. 2. 생명공학기술(재조합DNA기술)의 논쟁의 역사 1970년대 후반 유전자 재조합 기술과 세포융합기술의 발달로 생명공학기술이 발전하면서 윤리성과 안전성에 대한 논쟁이 지속되고 있다. 특히 인간 배아 연구와 GMO에 대한 규제가 주요 쟁점이 되고 있다. 3. 규제, 제도적 장치 각국은 생명...2025.05.11
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Hartl 유전학 정리노트 04. 유전자 연관과 유전자 지도 작성2025.05.101. 유전자 연관 유전자 연관은 동일한 염색체에 있는 유전자들이 함께 유전되는 현상을 말한다. 연관된 대립유전자들은 감수분열 시 서로 같이 있으며, 재조합 빈도를 통해 유전자 간의 거리를 측정할 수 있다. 재조합 빈도가 낮을수록 유전자 간 거리가 가깝다. 유전자 지도 작성에는 다형성 DNA 서열이 사용되며, 이를 통해 유전병 유발 유전자를 찾을 수 있다. 2. 유전자 지도 작성 유전자 지도 작성에는 재조합 빈도, 삼점교배, 다형성 DNA 서열 등이 활용된다. 재조합 빈도를 통해 유전자 간 거리를 측정할 수 있으며, 삼점교배를 통해 ...2025.05.10
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동 분석2025.11.171. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 주로 세균이 보유한 DNA 절단 효소로, 외부 바이러스의 DNA를 절단하여 자기 보호 기능을 한다. 종류에 따라 4개 또는 6개의 염기서열을 인식하여 비점착성 또는 점착성 말단을 생성한다. 같은 효소로 절단된 부위는 동일한 끝을 가지므로, 표적DNA와 플라스미드를 같은 제한효소로 자르고 ligase로 결합시켜 재조합 DNA를 만들 수 있다. DNA 클로닝 등 분자생물학 연구에 광범위하게 사용된다. 2. 전기영동(Electrophoresis) 전기장의 영향으로 전하를 띤 물...2025.11.17
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단백질 정제2025.01.231. 재조합 단백질 발현 재조합 단백질 기법은 정제하려고 하는 단백질의 유전자를 플라스미드 벡터에 삽입한 후, 이 플라스미드 벡터를 다시 세포에 도입하면 그 세포가 도입된 외부 유전자를 마치 원래 자기가 가지고 있던 유전자인 것처럼 발현을 하는 방법이다. 이번 단백질 정제실험에서 사용하는 플라스미드인 pET28a Vector는 kanamycin이라는 항생제에 대한 저항성을 부여하는 유전자인 KanR을 갖고 있어, 배양액에 kanamycin 항생제를 넣어놓고 그곳에 대장균을 넣으면 KanR을 갖고 있는 플라스미드인 pET28a Vec...2025.01.23
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제한효소 처리 실험 및 DNA 절단 분석2025.11.161. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하는 효소이다. 실험에서 사용된 HindⅢ와 Eco RⅠ은 각각 λ DNA를 다른 위치에서 절단한다. HindⅢ는 DNA를 5번 절단하여 6개의 segments를 생성하고, Eco RⅠ은 4번 절단하여 5개의 segments를 생성한다. 제한효소는 sticky end(상보적 단일가닥)를 만들어 유전자 클로닝에 활용된다. 2. 전기영동(Gel Electrophoresis) 전기영동은 절단된 DNA fragments를 크기별로 분리...2025.11.16
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