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[A+ 리포트] 세포생물학실험 - Subculture의 목적 및 정의, trypsin의 사용 이유 및 매커니즘2025.04.251. Subculture Subculture는 세포의 정상적인 증식을 위해 새로운 세포 배양 접시로 옮겨 세포의 대(generation or family line)를 계속해서 이어 배양하는 방법입니다. 세포 배양 접시 내에서 세포의 증식이 둔화되거나 멈추는 것을 방지하고 세포가 원활히 증식할 수 있도록 새로운 생장 환경을 제공하는 세포 실험적 기법입니다. 2. Trypsin Trypsin은 세포의 부착성을 제거하는 역할을 합니다. Trypsin은 세린 프로테아제로서 단백질의 펩타이드 결합을 끊어 세포 표면의 부착 단백질을 절단합니다...2025.04.25
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세포 계대배양 실험2025.01.021. 세포 계대배양 세포 배양 시 한정된 공간에서 세포 증식이 제한되므로, 계대배양을 통해 새로운 공간을 제공하여 세포가 지속적으로 분열할 수 있도록 한다. 또한 실험에 사용되는 세포의 일관성을 보장하기 위해 유전적 특성이 동일한 세포주를 지속적으로 대를 이어 배양한다. 계대배양 시 세포를 분리하는 방법으로는 enzymatic dissociation과 physical dissociation이 있으며, 세포의 특성을 고려하여 적절한 방법을 선택해야 한다. 2. Trypsin의 작용 원리 Trypsin은 단백질 분해효소로, 세포가 다른...2025.01.02
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Peptide 질량분석2025.01.231. 펩타이드 질량분석 단백질은 20종류의 아미노산들이 여러 개 연결된 폴리펩타이드 사슬이며, 펩타이드는 둘 이상의 아미노산이 탈수축합반응을 통해 결합된 것이다. MALDI-TOF 질량분석법은 분석 물질에 자외선을 흡수하는 matrix를 넣고 레이저로 기화시켜 기체상 이온을 만들어 질량/전하수 값을 측정하는 방법이다. 실험에서는 단백질을 트립신으로 가수분해한 펩타이드 용액을 CHCA matrix와 혼합하여 MALDI-TOF 질량분석을 수행하였고, 얻어진 펩타이드 질량지문으로부터 주어진 단백질을 동정하였다. 2. MALDI-TOF 질...2025.01.23
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마우스 종양 세포 4T1(동물세포) 배양 실험2025.01.181. 동물세포 배양 동물세포를 배양하는 것은 모든 세포생물학 실험에 있어서 가장 기초적인 실험 방법으로, qRT PCR, MTT assay, Cell Cycle Analysis 등의 In vitro(시험관 내) 수준에서 필요한 실험과 동물에 종양을 이식하는 등의 In vivo (생체 내) 수준의 연구에서도 사용되는 방법이다. 이번 실험에서는 마우스 종양 세포 4T1를 혈청 배지에 배양하는 방법으로 실험을 진행하였다. 2. 마우스 종양 세포 4T1 마우스 종양 세포 4T1은 진핵세포이자, 상피세포이며, 성장 속도가 빠른 세포이다. 마...2025.01.18
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서울대학교, 화학실험, 만점, A+, 펩타이드 질량분석 결과보고서2025.01.291. MALDI-TOF 펩타이드 질량분석 본 실험에서는 trypsin으로 가수분해한 단백질 샘플을 MALDI-TOF MS로 분석하여, 미지의 샘플이 lysozyme, BSA, ovalbumin 중 어떤 단백질에 해당하는지 알아내고자 하였다. 실험 결과, 미지의 단백질은 BSA로 확인되었으며, MALDI-TOF MS 데이터 분석 시 peptide coverage, miscleavage, 신호 대비 잡음 비율(S/N) 등을 고려하여 정확도를 높이는 것이 중요함을 알 수 있었다. 2. 펩타이드 질량지문(PMF) 단백질을 trypsin으로...2025.01.29
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[A+ 리포트] 6well plate를 이용한 Cell counting and seeding에 관한 실험 프로토콜2025.04.251. 세포 배양 실험 프로토콜에 따르면 세포 배양을 위해 clean bench, 37°C water bath, CO2 incubator 등의 장비를 사용하며, HeLa 세포주를 이용하여 실험을 진행합니다. 세포 배양 시 배지 온도, 세포 밀도, 오염 여부 등을 확인하는 것이 중요합니다. 2. 세포 계수 및 분주 실험에서는 trypsinization을 통해 세포를 분리하고, hemocytometer와 trypan blue 염색을 이용하여 세포 수를 계수합니다. 이후 계수된 세포를 6well plate에 적정 농도로 분주하는 과정을 거...2025.04.25
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생명과학보고서_Immunostaining (아주대전공실험2)2025.05.161. Cell Culture Cell culture란 다세포 생물체로부터 분리한 세포를 protease 등의 처리로 단세포로 분리하여 배양하는 과정이다. 우선 생체조직을 무균적으로 선발하여 trypsin 등의 소화효소로 처리한 후 단세포로 분리하여 초대배양을 한다. 또 계대 중인 세포계나 세포주를 같은 효소처리로 분산시켜 얻어낸 단세포를 증식배지에 이식, 접종하여 다음의 계대배양을 한다. Culture condition은 세포 type에 따라 매우 다양하지만 기본 환경은 필수 영양소(탄수화물, 아미노산, 비타민), serum(호르몬...2025.05.16
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화학공학실험 A+ 보고서_효소 반응공학_예비 보고서2025.01.131. 효소 반응의 기본 원리 이 실험의 목표는 효소 반응의 기본 원리를 이해하는 것입니다. Trypsin 효소를 이용한 단백질 분해 반응을 통해 효소 반응 속도론을 이해하고, 반응 속도에 영향을 미치는 변수들을 학습합니다. 또한 생물체로부터 유용 물질 생산을 위한 원리와 생산 공정의 기본 개념을 이해하는 것이 목표입니다. 2. 효소의 정의와 특성 효소는 생체 내의 화학 반응을 매개하는 단백질 촉매입니다. 촉매는 반응에서 소비되지 않으면서 반응 속도를 증가시키는 물질로, 일반적으로 활성화 에너지를 낮추는 새로운 반응 경로를 제공함으로...2025.01.13
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급성췌장염 CASE STUDY2025.01.031. 급성 췌장염의 정의 췌장은 길쭉하고 편평한 모양을 하는 장기로서 그 길이가 13 cm, 중량은 100 g 내외이다. 췌장은 배꼽 위쪽의 뱃속 깊이 위치하는데 위장 아래쪽의 후복강 안쪽에 있다. 췌장의 중요한 역할은 두 가지인데 우리가 먹는 음식물의 소화와 흡수에 필요한 소화효소를 분비하는 외분비 기능과 당을 조절하는 인슐린과 같이 체내 대사를 조절하는 호르몬 분비의 내분비 기능이다. 2. 췌장염의 원인 췌장염은 다른 염증처럼 세균의 침입으로 발병하는 것이 아니다. 췌장에서는 우리 몸에 들어오는 영양분을 분해·소화시키기 위한 효...2025.01.03
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MTT assay A+ report2025.01.171. MTT assay MTT assay는 세포 대사 활성을 색 변화로 측정하는 실험으로 세포 독성 실험이라고도 한다. Tetrazolium salt인 MTT를 살아 있는 세포에 처리하면, 미토콘드리아 안의 oxidoreductase enzyme(NADPH)에 의해 환원되어 보라색을 띠는 formazan 결정체를 형성한다. 죽은 세포의 경우, 미토콘드리아가 터져 없으므로 formazan이 형성되지 않고, 색을 띠지 않는다. 이렇게 생성된 formazan은 비수용성으로, 유기용매 또는 계면활성제 등에 녹여 570nm에서 흡광도(세포의...2025.01.17
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