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세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
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닭 배아 단백질 전기영동 결과보고서2025.04.261. 전기영동 전기 영동은 시료 속 단백질 아미노산의 R group이 특유의 전하를 모두 음극 처리하여 단백질의 질량에 따라 ladder가 나타나도록 하는 방법입니다. 이때 단백질과 결합력이 좋은 계면활성제인 sodium dodecyl sulfate buffer를 이용하면 단백질의 구조를 풀어 선형으로 만들고, 구조가 풀린 단백질에 달라 붙어 음극을 띠도록 만들 수 있습니다. 이러한 방법으로 단백질이 분자량에 따라 이동하도록 만들 수 있습니다. 2. RIPA buffer RIPA buffer는 pH를 유지하는 완충용액 역할을 하며,...2025.04.26
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생화학실험 단백질의 정성분석2025.05.061. Western blot Western blot은 단백질을 폴리아크릴아마이드 겔에서 전기영동을 이용하여 분리하고, 니트로셀룰로오스 membrane에 옮긴 후 찾고자 하는 단백질의 항체(1차 항체)와 결합시킨 후 이 항체와 반응하는 2차 항체를 이용하여 밴드를 형상화하는 기술이다. 이 기술은 크기별 분리, 단백질을 고체 지지체로 이동, 1차 및 2차 항체를 사용하여 표적 단백질을 표시하여 시각화하는 3가지 요소를 사용한다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 질량에 의한 단백질 분리가 가능한 전기 영동법이다. 폴리아크릴아마이드...2025.05.06