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Enzyme kinetic assay2025.01.271. 화공생물공학단위조작실험 화공생물공학단위조작실험1 과목에서 수행한 실험 보고서입니다. 효소 반응 속도 측정 실험을 통해 효소 반응 속도 상수(Km, Kcat)를 계산하고 결과를 분석하였습니다. 실험 결과와 고찰 내용을 정리하였습니다. 2. 효소 반응 속도 측정 효소 반응 속도 측정 실험을 수행하여 효소 반응 속도 상수(Km, Kcat)를 계산하였습니다. 실험 결과를 바탕으로 효소 반응 속도 및 반응 메커니즘을 분석하고 고찰하였습니다. 3. 효소 반응 속도 상수 효소 반응 속도 측정 실험을 통해 효소 반응 속도 상수인 Km(Mic...2025.01.27
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미카엘리스-멘텐 식과 효소 반응 속도2025.11.121. 반응 속도(Reaction Velocity) 반응 속도 V는 단위 시간당 반응하는 반응물의 양 또는 생성되는 생성물의 양으로 정의된다. 반응 속도는 반응물의 농도와 반응속도상수 k의 곱으로 표현되며, 반응물의 농도에 정비례하는 경우를 1차 반응(first order reaction)이라 한다. 반응물의 농도가 매우 높으면 농도 변화가 미미하여 1차 반응처럼 보이는 유사 1차 반응(pseudo-first order reaction)이 발생한다. 반응물의 농도와 반응 속도가 무관한 경우는 0차 반응(zero order)이라 부른다...2025.11.12
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이화여대 생물화학1 A+ 정리본2025.01.231. Km 값 Km값의 정의: 반응속도가 최대반응속도의 반값일 때의 기질농도이다. 최대 반응 속도의 절반에 도달하는 데 필요한 기질의 농도입니다. 효소에 대한 기질의 친화도를 보여주는 값이다. Km 값이 낮으면 효소가 기질에 대해 높은 친화도를 가지며, Km 값이 높으면 기질 친화도가 낮습니다. 2. Kcat 값 Kcat 값: 촉매 전환수 (turnover number)**로, 단위 시간당 하나의 효소 분자가 얼마나 많은 기질 분자를 product로 전환하는지 나타낸다. Kcat 값이 높으면 효소가 매우 빠르게 작동하고, Kcat ...2025.01.23
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효소학_경북대_족보_기말고사2025.05.031. 보조효소 보조효소에는 Ubiquinone, flavin, pyrimidine nucleotide, lipoic acid, glutathione, coenzyme A, porphyrin, SAM 등 10개가 있다. 이들 보조효소는 효소 단백질에 결합하여 효소의 활성이나 안정성에 필요한 구조를 유지하는 역할을 한다. 2. 금속이온의 역할 금속이온은 효소 단백질에 결합하여 활성이나 안정성에 필요한 구조를 유지하고, 기질과 결합하여 기질-금속 복합체를 형성하여 기질로 작용하게 하는 등 4가지 역할을 한다. 3. 분광학적 방법 분광학적...2025.05.03
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Horseradish Peroxidase 효소 동역학 분석 실험2025.12.121. 효소 동역학 분석(Enzyme Kinetic Assay) 시간에 따라 변화하는 샘플을 일정 간격으로 측정하여 효소 활성을 확인하는 방법. 분광광도계를 이용해 흡광도를 측정하고 Michaelis-Menten 방정식을 통해 Vmax, Km, Kcat 값을 구함. 기질 농도가 높을수록 흡광도가 증가하며 반응속도가 느려지는 양상을 보임. 정확한 결과를 위해서는 모든 기질에 동시에 반응물을 첨가하여 동일한 반응 조건을 형성해야 함. 2. Lineweaver-Burk 방정식과 효소 반응 상수 Michaelis-Menten 방정식을 직선식...2025.12.12
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효소반응공학 실험: Trypsin을 이용한 단백질 분해2025.12.201. 효소반응속도론 효소(E)와 기질(S)이 결합하여 생성물(P)을 만드는 과정을 설명한다. Vmax는 효소의 총량에 비례하는 최대 반응속도이고, Km은 반응 속도가 Vmax의 절반에 도달할 때의 기질 농도로 효소와 기질 간의 친화도를 나타낸다. Kcat은 효소가 단위 시간 동안 전환할 수 있는 기질 분자의 수이며, Kcat/Km은 효소의 촉매 효율을 나타낸다. Michaelis-Menten 방정식과 Lineweaver-Burk 방정식을 통해 이들 값을 정확하게 추정할 수 있다. 2. Trypsin 효소 트립신(EC 3.4.21.4...2025.12.20
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Horseradish Peroxidase 효소 동역학 분석 실험2025.11.161. 효소 동역학 분석 (Enzyme Kinetic Assay) Horseradish Peroxidase (HRP)를 이용한 효소 동역학 실험으로, ABTS를 기질로 사용하여 분광광도계로 흡광도 변화를 측정했다. 다양한 기질 농도(50-400 μM)에서 시간에 따른 흡광도 변화를 405nm에서 20초 간격으로 5분간 측정하여 초기 반응속도(V₀)를 구했다. Michaelis-Menten 반응식과 Lineweaver-Burk plot을 이용하여 Vmax, Km, Kcat 값을 계산했다. 2. Lineweaver-Burk Plot 분석...2025.11.16
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YADH 효소의 kinetics와 경쟁적 저해제의 영향2025.01.031. 효소 kinetics 이번 실험에서는 ethanol의 산화 반응을 촉매하는 YADH 효소에 대한 assay를 진행하였습니다. YADH 효소는 조효소로 NAD+가 필요하며, NAD+와 ethanol의 반응 결과로 ethanol이 산화됩니다. 실험에서는 ethanol과 구조적으로 유사한 2,2,2-trifluoroethanol을 competitive inhibitor로 사용하여 효소의 촉매 작용에 대한 저해제의 영향을 확인하고자 하였습니다. Lineweaver-Burk plot을 그려 Vmax, KM을 구하고, 초기속도, Vmax...2025.01.03
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트립신 효소의 반응속도론 분석 실험2025.12.201. 효소반응속도론 트립신 효소가 Nα-benzoyl-Arg-p-nitroanilide 기질과 반응하여 p-nitroaniline을 생성하는 과정을 분석했다. 기질 농도(10~2000 μM)에 따른 반응속도를 측정하여 Michaelis-Menten 속도론을 적용했다. 최대반응속도(Vmax) 55.56 μM/min, Michaelis 상수(Km) 2848.5 μM, 촉매효율(Kcat/Km) 3.27×10⁻⁵ μM⁻¹s⁻¹을 산출했다. 기질 농도가 증가할수록 반응속도가 증가하다가 포화에 도달하는 효소 반응의 특성을 확인했다. 2. UV...2025.12.20
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효소반응공학 실험: Trypsin의 반응속도론 분석2025.11.181. 효소반응속도론 및 Michaelis-Menten 방정식 Trypsin 효소의 기질 농도별 반응속도를 측정하여 Michaelis-Menten 방정식과 Lineweaver-Burk 방정식을 적용했다. 실험 결과 Vmax는 36.363 μM/min, Km은 2139 μM으로 계산되었다. 기질 농도가 낮을 때는 반응속도가 기질 농도에 비례하여 증가하지만, 일정 농도 이상에서는 Vmax에 수렴한다. Kcat/Km 값(6.54×10⁻⁶ μM⁻¹sec⁻¹)을 통해 촉매 효율을 평가할 수 있다. 2. UV-Vis 분광광도법을 이용한 정량분석...2025.11.18
