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식물분자생물학실험 Agrobacterium 매개 식물 형질전환 예비보고서2025.01.181. Agrobacterium 매개 식물 형질전환 Agrobacterium을 매개체로 활용하여, 식물에 유전자를 도입하여 형질전환하는 방법에 대하여 학습한다. 유전적 형질전환이란 수용자 세포가 외부 유전물질을 받아들여 자신의 유전정보에 도입하는 과정을 통해 유전자의 변환이 일어나는 현상을 말한다. 식물의 유전자를 변형시키기 위한 방법으로 가장 널리 활용되고 있는 방법은 Agrobacterium 매개 형질전환이다. Agrobacterium tumefaciens는 다수의 외떡잎 혹은 쌍떡잎 속씨식물들과 겉씨식물에 DNA를 전달할 수 있...2025.01.18
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식물분자생물학실험 Plant Transformation 결과보고서2025.01.181. Floral-dipping method Floral-dipping method는 Arabidopsis를 간단하게 형질 전환하는 방법 가운데 하나이며 1993년 Bechtold et al.(1)의 논문을 통하여 제안되었다. 이 방식은 대부분의 형질 전환된 자손에서 유전적 균일성을 확보할 수 있으며, 조직 배양 및 재생과 관련된 체세포 변이가 최소화된다는 장점이 있다. 이 방법의 주요 단점은 단 하나의 식물 종인 Arabidopsisthaliana에 대해서만 정상적으로 작용한다는 것으로, 다른 식물종에 이 방식을 활용하지못한다는 ...2025.01.18
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식물분자생물학실험 Colony PCR 결과보고서2025.01.181. Colony PCR Colony PCR은 형질 전환 후 selective media에서 성장한 박테리아의 colony를 신속하게 screening하여 원하는 유전자가 존재하는지 확인하는 PCR 검사 기법입니다. PCR 반응 과정에서 heating step이 존재하기 때문에 대부분의 형질전환체는 lysis되어 유전물질을 방출하게 되고, 이때 방출된 유전물질을 template으로 활용하여 amplification reaction을 진행합니다. Positive Control과 Negative Control은 PCR 반응의 정확성과 ...2025.01.18
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식물분자생물학실험Arabidopsis seed sterilization and germination 결과보고서2025.01.181. Arabidopsis seed sterilization and germination 본 실험에서는 형질전환된 Arabidopsis seed 를 70% ethanol과 10% NaClO 희석액을 이용해 소독하여 종자 표면의 미생물 오염원을 제거하고, 항생제가 투입된 media에서 발아시켜 형질전환체를 선별하는 과정을 진행하였다. 실험 결과, 다수의 종자가 정상적으로 발아되었고, 배지에서 오염원에 의한 contamination이 관찰되지 않았다. 이는 70% ethanol과 10% NaClO 희석액이 식물 종자 표면의 오염원을 정...2025.01.18
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식물분자생물학실험 Agrobacterium Transformation 결과보고서2025.01.181. Agrobacterium competent cell (GV3101) GV3101은 Agrobacterium tumefaciens Chemically Competent Cell의 일종으로, 애기장대, 담배, 옥수수, 감자 등의 식물을 형질 전환하는데 사용될 수 있다. 여기에는 screening을 위한 rifampicin resistant gene (rif)이 미리 포함되어 있으며, gentamicin resistance gene 과 vir gene을 포함한 Ti plasmid를 운반할 수 있다. 2. Freeze-Thaw met...2025.01.18
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식물분자생물학실험 Histochemical GUS assay 결과보고서2025.01.181. GUS assay GUS assay는 Escherichia coli β-glucuronidase gene uidA (GUS)를 식물에서 reporter gene으로 활용하는 방법으로, 형광 측정, 분광 광도 측정 또는 조직화학적 기술을 통해 목적 유전자의 발현 위치를 확인할 수 있다. GUS assay는 높은 감도, 효소 안정성, 단순성으로 인해 자주 활용되며, 특히 histochemical staining을 통해 endogenous promoter activity를 관찰하는데 유용하다. 2. GUS 염색 원리 GUS assa...2025.01.18
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쌀의 체세포 배 발생 조직학 (Oryza sativa cv. 5272)2025.01.141. 쌀의 체세포 배 발생 쌀(Oryza sativa cv. 5272) 배 발생 캘러스는 2,4-디클로로 페녹시 아세트산 2.5 mg/l이 보충 된 Murashige & Skoog (1962) 배지에서 성숙한 접합자 배 배양으로부터 얻었다. 체세포 배 발생에 대한 조직학적 분석 결과, 2주간의 캘러스 유도 배지에서 외식편 배양 후, 부정배 발달은 캘러스의 말초 영역에 존재하는 사전 배 발생 세포의 군집에서부터 시작되었다는 것을 보여주었다. 배 발생 캘러스의 외부 세포 층은 치밀한 세포질과 두드러진 핵 및 핵소체를 갖는 작은 등직경의...2025.01.14
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DNA 변형을 통해 형질전환된 농작물 가운데 한 품종을 선정한 후 발현된 형질의 특성과 성과2025.04.291. 신품종의 육성배경과 특징 1980년대 중반 이후 지적재산권 보호가 EU, 일본, 미국 등 주요 선진국의 통상현안으로 등장하였고, 1994년 UR타결에 따라 "세계 무역기구의 무역 관련 지적재산권 협정(WTO/TRIPs)"이 다자간 협정으로 제정되어 1995년 1월 1일부터 발효되었고 TRIPs(Trade Related Intellectual Properties) 협정은 식물품종을 특허법 또는 개별법 등으로 보호하도록 하여 품종보호제도는 WTO 가입국가의 의무사항이 되었다. 우리나라의 전통적으로 식물의 작물화 및 개량을 위해 선...2025.04.29
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Ligation and transformation2025.01.141. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기 서열을 인식하고 절단하는 가수분해 효소이다. 제한효소는 박테리아가 박테리오파지 바이러스로부터 자신을 보호하기 위한 수단이다. 제한효소는 다양한 분류 기준에 의해서 Ⅰ형, Ⅱ형, Ⅲ형으로 나뉜다. 제한효소는 유전자 재조합 외에도 유전자 클로닝, 형질전환 등 여러 가지 생명공학 기술에 널리 활용된다. 2. 플라스미드 DNA 플라스미드 DNA는 주형 DNA와 별도로 박테리아에 존재하는 DNA이다. 플라스미드 DNA는 진정세균뿐만 아니라 고세균이나 진핵생물에도 존재한다. 플라스미드 DNA는 독...2025.01.14
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설치류의 해부학적 특징과 기능-쥐2025.05.141. 설치류의 해부학적 특징 및 기능 이번 실험에서는 설치류인 쥐의 해부를 통해 척추동물의 외부형질은 물론 각 조직계와 기관들의 모양과 위치를 관찰하였다. 실험에서는 마우스를 CO2 chamber에 넣어 질식사 시킨 후 해부하여 내부 장기를 관찰하였다. 특히 비장, 위, 간, 신장, 창자, 심장, 폐 등의 기관을 관찰하였다. 또한 설치류의 마취 방법과 안락사 방법에 대해서도 살펴보았다. 마취에는 휘발성 약제와 주사 약제가 사용되며, 안락사에는 저산소증 유발법, 펜토바비탈 주사법, 경추탈구법 등이 있다. 형질전환 마우스는 유전자 공학...2025.05.14
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