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박테리아에서 DNA 분리2025.01.271. plasmid DNA 분리 실험 목적은 plasmid DNA 분리에 대해 이해하고, 그 과정 중 하나인 plasmid mini-preparation에 대해 알아보는 것이다. plasmid DNA 분리법의 공통적인 세 단계는 overnight culture, mini preparation, 순수한 plasmid DNA 분리 과정이다. mini-prep은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법으로, 알칼리 조건에서 세포를 파괴시켜 DNA만을 분리하는 것이다. 2. plasmid DNA 분리 시약 실험에 사용된 시약은 LB 배지...2025.01.27
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[A+ 리포트] 6well plate를 이용한 Cell counting and seeding에 관한 실험 프로토콜2025.04.251. 세포 배양 실험 프로토콜에 따르면 세포 배양을 위해 clean bench, 37°C water bath, CO2 incubator 등의 장비를 사용하며, HeLa 세포주를 이용하여 실험을 진행합니다. 세포 배양 시 배지 온도, 세포 밀도, 오염 여부 등을 확인하는 것이 중요합니다. 2. 세포 계수 및 분주 실험에서는 trypsinization을 통해 세포를 분리하고, hemocytometer와 trypan blue 염색을 이용하여 세포 수를 계수합니다. 이후 계수된 세포를 6well plate에 적정 농도로 분주하는 과정을 거...2025.04.25
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MTT assay A+ report2025.01.171. MTT assay MTT assay는 세포 대사 활성을 색 변화로 측정하는 실험으로 세포 독성 실험이라고도 한다. Tetrazolium salt인 MTT를 살아 있는 세포에 처리하면, 미토콘드리아 안의 oxidoreductase enzyme(NADPH)에 의해 환원되어 보라색을 띠는 formazan 결정체를 형성한다. 죽은 세포의 경우, 미토콘드리아가 터져 없으므로 formazan이 형성되지 않고, 색을 띠지 않는다. 이렇게 생성된 formazan은 비수용성으로, 유기용매 또는 계면활성제 등에 녹여 570nm에서 흡광도(세포의...2025.01.17
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계대배양 실험 결과 보고서2025.01.131. 계대배양 실험 이번 실험을 통해 HeLa cell의 배지 조성 방법과 시약들의 용도를 알 수 있었고, 마이크로 피펫과 파이펫에이드 사용법을 익힐 수 있었습니다. 세포가 오염되지 않도록 클린벤치에 들어가는 모든 물품을 소독하고, 배지 및 시약의 뚜껑과 병의 입구, 배양 접시의 뚜껑을 열고 닫을 때 화염멸균을 하는 등 실험 과정에서 주의해야 할 점들을 배울 수 있었습니다. 실험 중 파이펫에이드 사용 시 거품이 생기는 문제가 있었지만, 이를 해결하는 방법을 찾아 개선할 수 있었습니다. 2. 세포 배양 세포 배양 실험에서는 부착성 세...2025.01.13
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Crystal Violet Assay 세포생존력검사, 세포독성검사 결과 레포트2025.05.111. Crystal Violet Assay 이번 실험에서는 in vitro 상에서 세포의 독성에 영향을 미치는 약물을 농도에 따라 처리해 세포의 생존력을 확인하고자 한다. Crystal Violet Assay 방법을 통해 농도별 cisplatin 투여시 B16F10 cells의 control 대비 세포 생존력을 확인할 수 있다. 2. 세포독성검사 세포독성 검사는 생체(in vivo)에서 하는 방법과 생체 외(in vitro)에서 하는 방법으로 분류할 수 있다. 생체 외에서는 주로 배양된 세포나 조직을 재료로 하는 경우가 대부분이다....2025.05.11
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[유전학] 세포배양 방법 및 과정 분석2025.05.031. 세포 배양 세포 배양은 일반적인 자연환경과는 다른 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정을 총칭한다. 세포가 살아있는 조직에서 분리가 된다면 생존할 가능성이 낮아지기 때문에 신중하게 제어된 조건을 유지해줄 필요가 있다. 이 조건은 세포의 유형에 따라 다르지만 일반적으로 아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기질 등의 필수 영양소와 호르몬, 항생제 등이 필요하고 이를 적절하게 공급하기 위한 배지가 있는 적절한 용기로 구성 되어야한다. 2. 세포 배양 방법 세포 배양을 하기 위해서는 배양할 세포를 얻어와야 하는데 그 방법에는 크게 두가지...2025.05.03
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[융합과학] 우리 주변의 그람 양성군2025.05.061. 그람 염색 그람 염색은 이용 가치에 비해 그 과정이 간단하고 쉽기 때문에 과학자들에게 기본적인 실험으로 알려져 있다. 최근 이러한 그람 양성군, 음성군과 연관된 건강상의 여러 문제점들이 발생하면서 이에 대한 해결책이 시급해지고, 그람 염색의 가치도 더욱 높아지고 있다. 2. 그람 양성균 2015년 말에 일어난 건대 집단 폐렴 사건의 원인으로 지목된 방선균과 올해 미국의 한 연구를 통해 유방암 환자들의 세포에서 현저히 많이 관찰되었다고 밝혀진 포도상규군, 코리네박테리움 등의 세균들이 모두 그람 양성군이라는 사실을 알게 되었다. ...2025.05.06
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마우스 종양 세포 4T1(동물세포) 배양 실험2025.01.181. 동물세포 배양 동물세포를 배양하는 것은 모든 세포생물학 실험에 있어서 가장 기초적인 실험 방법으로, qRT PCR, MTT assay, Cell Cycle Analysis 등의 In vitro(시험관 내) 수준에서 필요한 실험과 동물에 종양을 이식하는 등의 In vivo (생체 내) 수준의 연구에서도 사용되는 방법이다. 이번 실험에서는 마우스 종양 세포 4T1를 혈청 배지에 배양하는 방법으로 실험을 진행하였다. 2. 마우스 종양 세포 4T1 마우스 종양 세포 4T1은 진핵세포이자, 상피세포이며, 성장 속도가 빠른 세포이다. 마...2025.01.18
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생물공정실험 결과보고서_P1 Transduction2025.01.101. 박테리아의 형질전환 이번 실험은 kanamycin저항성이 있는 DNA를 가지고 있는 Phage를 통해 bacteria에 저항성 DNA를 Transduction해보고 이를 EBU plate라는 kanamycin이 있는 배지에 배양함으로 transduction이 제대로 실행되었는지 확인하는 실험이었다. 실험 과정 중 여러 시약이 사용 되었는데, 먼저 E. coli 샘플에 Phage를 넣고 P1 salt를 넣어 주었다. 이 시약은 Phage가 bacteria cell 표면에 잘 붙도록 하여 transduction의 효율을 높여주기 ...2025.01.10
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세포생리학실험_cell culture, Genomic DNA Isolation_genomic DNA 추출, total RNA 추출, 전기영동2025.01.131. 세포 배양 HEK 293T 세포를 DMEM 배지와 FBS를 사용하여 배양하였다. 세포는 처음에는 동글동글한 모양이었지만 점차 바닥에 붙어 자라나면서 별모양의 형태를 띠었다. 배지의 색이 점점 노란색으로 변하면서 세포가 죽기 시작하였다. 이를 통해 세포가 일정 횟수의 분열을 한 후 노화되는 과정을 관찰할 수 있었다. 2. Genomic DNA 추출 HEK293T 세포에서 genomic DNA를 추출하였다. 세포를 용해시킨 후 단백질과 RNA를 제거하는 과정을 거쳐 순수한 DNA를 분리하였다. 전기영동 결과 DNA 밴드가 마커보다...2025.01.13
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