1. 형질전환(Transformation) 형질전환은 외부의 DNA 또는 플라스미드가 세포에 도입되어 새로운 유전형질을 획득하는 현상입니다. 자연계에서는 세균 성장 곡선의 정체기에 주로 발생하지만, 실험실에서는 화학적 또는 물리적 처리를 통해 수용능 있는 세포(competent cell)를 만들어 효율적으로 형질전환을 수행합니다. 본 실험에서는 CaCl2 처리를 통해 TOP10 E.coli competent cell을 준비하고, heat shock 방식으로 플라스미드 DNA를 세포 내로 도입했습니다. 2. 블루-화이트 스크리닝(Bl...

1. 알칼리 용해법(Alkaline Lysis Method) 플라스미드 DNA를 분리하는 표준 방법으로, 알칼리 환경에서 대장균의 세포벽과 세포막을 용해시킨 후 산성 용액으로 DNA를 분리한다. 이 방법은 플라스미드 DNA와 염색체 DNA의 크기 및 구조적 차이를 이용하여 선택적으로 플라스미드만 추출할 수 있다. 높은 pH에서 큰 크기의 염색체 DNA는 변성되지만, 작고 supercoiled 구조의 플라스미드 DNA는 중화 과정을 통해 원상태로 복원되는 원리를 활용한다. 2. 플라스미드 DNA의 특성 플라스미드는 대장균 내에서 주로...