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Stryer 생화학2024.10.131. 면역 발색법 (Western Blot) 1.1. 실험목적 세포나 조직 내의 특정 단백질의 발현 양을 알아보는 면역 발색법(Western blot 또는 Immunoblot)을 통해 배양 근원 세포의 분화에 따른 creatine kinase, actin의 발현 변화를 알아보는 것이 이번 실험의 목적이다. 1.2. 실험결과 1.2.1. 면역발색 결과 면역발색 결과에 따르면, 상기 실험에서는 세포 내 단백질의 발현 양상을 확인하기 위해 creatine kinase와 actin을 대상으로 Western blot 분석을 수행하였다. ...2024.10.13
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제한효소지도 실험보고서2024.10.171. Restriction Enzyme Mapping 1.1. 목적 제한효소 매핑 실험의 목적은 제한효소의 특성을 이해하고 전기 영동법을 이용하여 제한효소지도 작성을 해보는 것이다. 즉, 제한효소의 특성과 제한효소지도 작성 방법을 실험을 통해 익히는 것이 목적이다." 1.2. 이론 1.2.1. Restriction Enzyme 자연 상태에 있는 대부분의 DNA 분자들은 너무 커서 실험실에서 다루거나 분석하기가 쉽지 않다. 예를 들면, 염색체는 수천 개의 유전자를 가지고 있으며, 100Mb 이상의 긴 단일 DNA 분자이다. DNA...2024.10.17
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대장균 고체배지 배양 실험2024.11.131. 서론 1.1. 대장균의 특성 대장균은 간균에 속하는 장내세균의 하나로, 주로 온혈 동물의 창자에서 많이 볼 수 있다"." 특히 대장에 많이 서식하기 때문에 대장균이라고 부르며, 장 속에 사는 대부분의 대장균은 비병원성 박테리아들이라서 문제가 없지만, 대장균이 장 이외의 부위에 들어가거나, 장 속에서도 특정한 항원을 가진 병원성 대장균은 염증이나 식중독을 일으키는 경우가 있다"." 하지만 해롭지 않은 변종은 대장에서 우리와 공생하며 살아가는 공생동물이다"." 대장균들은 비타민 K2 등을 생산하여 이로움을 주기도 하며, 창자에서...2024.11.13
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형질전환 실험2024.11.171. 형질전환 1.1. 실험 이론 및 원리 1.1.1. 실험개요 형질전환이란 외부에서 만들어진 플라스미드를 플라스미드가 없는 원핵 세포 cell에 넣어 그 원핵 세포가 본래 성질과는 다른 새로운 유전형질을 나타내게 하여 삽입한 플라스미드를 대량으로 키우는 과정이다. 이 실험개요에 따르면 형질전환은 폐렴구균을 통해 DNA가 유전물질임을 PCR과 클로닝 등의 방법으로 증명했다. 예를 들어 인슐린의 경우 처음에는 돼지에게서 추출했지만 많은 수요에 비해 공급이 원활하지 못했고 깨끗하지 않을 수도 있다는 의견 때문에 중지되었다. 그 ...2024.11.17
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유전자 복구 NHEJ와 HDR, 크리스퍼 문제점 및 실태2024.11.161. 유전자 가위 기술의 발전과 응용 1.1. 유전자 편집 기술의 진화 1.1.1. 제한효소를 이용한 초기 유전자 편집 제한효소를 이용한 초기 유전자 편집은 유전자 공학의 역사에서 중요한 시작점이 되었다. 1970년대 초반 박테리아에서 발견된 제한효소는 특정 DNA 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하는 기능을 가지고 있었다. 이러한 제한효소의 특성을 이용하여 과학자들은 DNA를 자르고 붙이는 기술을 개발할 수 있었다. 제한효소를 이용한 초기 유전자 편집 기술은 DNA의 염기서열을 변형하거나 특정 유전자를 삽입, 제거하는 방식...2024.11.16
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유전자 재조합2024.08.301. 유전자 재조합 기술 1.1. 유전자 재조합의 개념 유전자 재조합이란 특정 표현형으로 발현하는 DNA를 확인하고 분리해낸 DNA 단편을 다른 DNA 단편과 융합시켜 재조합 DNA를 만드는 기술이다. 유전자 재조합을 한 후 증폭을 통해 재조합한 DNA를 다량 얻어야 하므로 조작이 쉽고 클로닝이 가능한 플라스미드 DNA를 주로 사용한다. 플라스미드 DNA란 벡터로 가장 많이 사용되는 것으로, 염색체와 독립하여 존재하지만 복제가 가능하며, 때로는 염색체에 삽입이 가능한 염색체 외의 DNA로 안정적으로 유전되지만 숙주 세포의 생장과 ...2024.08.30
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크리스퍼가 온다2024.11.031. 크리스퍼 유전자가위 1.1. 크리스퍼 유전자가위의 정의 CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat)는 세균의 적응 면역 시스템에서 유래된 유전자 편집 도구이다. CRISPR는 규칙적으로 배열된 짧은 반복 서열로 구성된 DNA를 말한다. 세균은 바이러스에 감염되면 바이러스의 DNA 일부를 자신의 유전체에 기억해 두었다가 차후 바이러스가 침입하면 그 정보를 이용해 바이러스 DNA를 찾아서 절단하는 방어 시스템을 가지고 있다. 이러한 세균의 적응 면역 시스템이...2024.11.03
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유전자 효소2024.09.061. 유전자 클로닝을 위한 효소들의 종류와 특징 1.1. 유전자 클로닝을 위한 효소의 종류 유전자 클로닝을 위한 효소의 종류는 다음과 같다. 뉴클레아제는 핵산 분자를 절단하거나 짧게 하는 효소이다. 엑소뉴클레아제는 DNA 분자의 말단에서 뉴클레오티드를 하나씩 제거하며, 엔도뉴클레아제는 DNA 분자 내에서 내부 포스포디에스테르 결합을 끊을 수 있다. 리가아제는 핵산 분자들을 연결해준다. 세포에서 DNA 리가제는 DNA 복제동안에 이중가닥 DNA 분자 내에서 일어나는 한가닥 파손을 복구한다. 중합효소는 분자의 복사체를 만든...2024.09.06
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λDNA와 제한효소를 사용한 DNA ladder 만들기2024.10.101. 제한효소와 DNA 분석 1.1. 제한효소의 기능 1.1.1. 제한효소의 특성 제한효소의 특성은 다음과 같다. 제한효소는 DNA 사슬 상의 특정한 염기배열을 인식한 후, DNA의 두 사슬을 모두 절단하는 endonuclease이다. 제한효소는 인식하고 절단하는 염기배열에 따라 세 종류(I, II, III)로 나뉜다. 그 중 type II 제한효소는 특정 염기배열(일반적으로 4~6개의 염기쌍으로 구성됨)을 인식하고 인식한 염기서열 내의 특정 부위를 절단한다. 이러한 특성 때문에 제한효소는 DNA 분석, 지도 작성과 gene...2024.10.10
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제한 효소와 소화 실험 보고서2024.09.191. 유전자 클로닝을 위한 제한효소 실험 1.1. 제한효소 EcoRI의 특성 EcoRI는 대장균의 플라스미드 RY13에서 코드되며 DNA의 특수한 6염기배열 5′-GAATTC-3′을 인식하여 다음과 같이 절단한다. 즉, 5′-인산과 3′-OH말단이 생성된다. EcoRI는 50mM NaCl, 100mM tris-HCl 완충액(pH 7.5), 5mM MgCl2액에서 최적반응조건을 나타낸다. 그러나 고농도의 글리세롤이나 저농도의 염분 조건에서는 스타 활성(AATT만 인식)이 나타나기 쉽다. EcoRI는 가격이 저렴하여 유전자지도만들기(...2024.09.19
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