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제한효소지도 실험보고서2024.10.171. Restriction Enzyme Mapping 1.1. 목적 제한효소 매핑 실험의 목적은 제한효소의 특성을 이해하고 전기 영동법을 이용하여 제한효소지도 작성을 해보는 것이다. 즉, 제한효소의 특성과 제한효소지도 작성 방법을 실험을 통해 익히는 것이 목적이다." 1.2. 이론 1.2.1. Restriction Enzyme 자연 상태에 있는 대부분의 DNA 분자들은 너무 커서 실험실에서 다루거나 분석하기가 쉽지 않다. 예를 들면, 염색체는 수천 개의 유전자를 가지고 있으며, 100Mb 이상의 긴 단일 DNA 분자이다. DNA...2024.10.17
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분자생물학2025.04.021. 분자생물학의 역사 및 DNA 구조 1.1. DNA 발견 과정 프리드리히 미셔는 호흡기 감염 환자의 백혈구에서 DNA를 발견했다. 그는 이 물질이 세포의 중요한 성분이며 인(phosphorus)을 함유하고 있어 유전물질로서의 역할을 할 것이라 추정했다. 멘델은 유전 인자를 발견했으며, 보베리와 서튼은 염색체 이론을 제안했다. 모건은 초파리 실험을 통해 염색체가 특정 형질을 발현시킨다는 것을 확인했다. 그리피스는 폐렴균 실험에서 S형 폐렴균의 열처리 후 R형으로 전환되는 '전환 인자'를 발견했고, 이는 DNA가 유전물질임을 시사...2025.04.02
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제한 효소와 소화 실험 보고서2024.09.191. 유전자 클로닝을 위한 제한효소 실험 1.1. 제한효소 EcoRI의 특성 EcoRI는 대장균의 플라스미드 RY13에서 코드되며 DNA의 특수한 6염기배열 5′-GAATTC-3′을 인식하여 다음과 같이 절단한다. 즉, 5′-인산과 3′-OH말단이 생성된다. EcoRI는 50mM NaCl, 100mM tris-HCl 완충액(pH 7.5), 5mM MgCl2액에서 최적반응조건을 나타낸다. 그러나 고농도의 글리세롤이나 저농도의 염분 조건에서는 스타 활성(AATT만 인식)이 나타나기 쉽다. EcoRI는 가격이 저렴하여 유전자지도만들기(...2024.09.19
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제한효소 및 소화 실험: 효소작용 영향2024.09.191. 제한효소와 DNA 절단 1.1. 제한효소의 종류와 특성 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 핵산분해효소(endonuclease)의 하나로서, 유전공학에서 재조합 DNA를 만들기 위해 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소는 주로 세 가지 유형으로 분류된다. 첫째, Ⅰ형 제한효소는 인식하는 염기서열과 절단 위치가 다른 곳에 있어 연구에 부적합하다. 둘째, Ⅱ형 제한효소는 특정 염기서열을 인식하여 이를 정확히 절단하는 특성을 가지고 있어 유전자 조작에 주로 사용된다. 이 제한효소는 인식하는 염기서열이...2024.09.19
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백터2024.10.211. 유전공학의 개관 1.1. 유전공학의 정의 유전공학이란 DNA 및 다른 핵산의 인위적인 조작, 변형, 재조합을 통하여 생명체의 유전자를 변화시키는 기술이다. 이는 과학기술의 발전에 따라 등장한 새로운 학문 분야로, 생명체의 유전 메커니즘을 이해하고 이를 응용하여 다양한 분야에서 활용되고 있다. 유전공학은 분자생물학과 생명공학을 아우르며, 현대 생명과학 연구의 핵심 기술로 자리잡고 있다." 1.2. 유전공학 발전의 역사 유전공학의 발전의 역사는 다음과 같다. 유전공학의 역사는 1866년 멘델의 유전 법칙 발견으로부터 시작된다고...2024.10.21
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Gene cloning2024.09.301. 유전자 클로닝 1.1. 유전자 클로닝의 개요 유전자 클로닝이란 생물체의 특정 유전자를 세포에서 추출한 후, 그 유전자를 벡터 DNA에 삽입하고 Competent Cell에서 증식시킴으로써 균일한 유전자 집단을 생성하는 기술이다. 다른 말로 유전자 클론화라고도 하며 특정 유전자의 대량 복제를 위해 쓰이는 중요한 DNA 재조합 기술이다. 이 기술은 기본적으로 수많은 종의 유전체와 종간 유전적 다양성을 연구하기 위해서 유전체의 DNA 조각, 혹은 서로 겹쳐져 있는 염기서열의 분석을 위해 활용된다. 또한 개별 유전자 수준에서 핵산의...2024.09.30
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특정 유전자를 선택하여 T-Vector에 삽입시키고 이를 E-Coli 내에 transformation 시켜 형질전환 박테리아를 선택적으로 배양2024.11.161. Transformation 조 1.1. 실험 목적 재조합된 DNA(eGFP DNA)를 Competent cell에 넣고, 배양된 Colony를 대조군과 비교함으로써 형질전환(Transformation)에 관하여 고찰해보는 것이 이 실험의 목적이다. 수용세포에 노출된 DNA가 흡수, 통합, 발현되는 과정을 나타내는 형질전환은 몇몇 박테리아 사이에서 자연적으로 일어나는 현상이다. 그러나 대장균을 포함한 다른 종들은 외부 DNA를 흡수할 능력이 없기 때문에 인공적인 방법으로 형질전환을 유도하게 된다. 이번 실험에서는 경쾌한 녹색...2024.11.16
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플라스미드 재조합2024.11.111. 플라스미드 재조합 이론과 방법 1.1. 목적 PCR로 증폭된 DNA를 플라스미드 벡터에 삽입을 한 후 competent cell을 형질전환을 시키는 것이 이 실험의 목적이다. 이를 통해 재조합 플라스미드를 대량으로 증폭하여 유전자 재조합 기술을 이용한 단백질 대량 생산 등의 응용을 목표로 하고 있다. 1.2. 실험 재료 TA Cloning에 사용되는 실험 재료는 다음과 같다. PCR product 5ul, Ligase 1ul, Ligase buffer 7.5ul, T-vector, DW 2.5ul, 원심분리기이다. Compe...2024.11.11