소개글
"혈장 분리"에 대한 내용입니다.
목차
1. 실험 개요
1.1. 혈청, 혈장, 전혈의 개념 및 특징
1.2. 원심분리기의 원리와 사용 방법
1.3. 마이크로파이펫의 사용법
2. 실험 방법
2.1. 혈장 분리
2.2. 혈장 단백질 제거
2.3. 용혈 현상
2.4. Calibration
3. 혈액 응고 방지제
3.1. 항응고제의 종류
3.2. 항응고제의 화학적 작용
4. 혈액 성분 분리
4.1. 혈장 분리
4.2. 혈청 분리
5. 혈당 측정
5.1. O-toluidine법을 이용한 혈장 포도당 정량
6. 실험 결과 및 토의
7. 참고 문헌
본문내용
1. 실험 개요
1.1. 혈청, 혈장, 전혈의 개념 및 특징
혈청, 혈장, 전혈의 개념 및 특징은 다음과 같다.
혈액은 혈구와 혈장으로 구성되어 있다. 혈구는 적혈구, 백혈구, 혈소판으로 이루어져 있으며, 혈장은 주로 수분으로 이루어진 액체 성분이다. 혈장은 혈액 속의 유형성분인 적혈구, 백혈구, 혈소판 등을 제외한 부분으로, 담황색을 띠는 중성의 액체이다. 혈장에는 생명유지에 필수적인 혈액응고인자, 전해질 등이 포함되어 있다.
혈청은 혈장에서 섬유소원(피브리노겐)을 제거한 나머지 부분이다. 혈액을 시험관에 넣어 두면 응고하여 응혈이 되고, 이것이 수축하면 암적색의 덩어리인 혈병과 담황색의 투명한 액체인 혈청으로 분리된다. 혈청에는 면역과 관련된 γ-글로불린 등의 성분이 포함되어 있다.
전혈은 항응고제가 첨가되지 않은 채로 채취한 혈액을 의미하며, 혈장, 적혈구, 백혈구, 혈소판 등 혈액의 모든 성분이 포함된 상태이다. 전혈을 원심분리하면 적혈구, 혈장, 백혈구 등으로 분리할 수 있다.
1.2. 원심분리기의 원리와 사용 방법
원심분리기는 원심력을 이용하여 균질액을 여러 부분으로 나눌 목적으로 가장 많이 이용되는 기계이다. 균질액을 시험관에 넣고 원심분리기를 고속으로 회전시키면 입자의 크기와 밀도에 따라 물질을 분리할 수 있다. 회전 속도의 단위로 RPM을 사용하며, 회전하면서 일을 하는 장치가 1분 동안 몇 번의 회전을 하는지 나타내는 단위이다. 원심분리기는 회전 속도에 따라 저속원심분리기, 고속원심분리기, 초원심분리기로 나눌 수 있다. 이번 실험에서는 3000rpm의 속도로 원심분리를 했기 때문에 저속원심분리기를 사용했다고 볼 수 있다.
1.3. 마이크로파이펫의 사용법
마이크로파이펫의 사용법은 다음과 같다. 마이크로파이펫은 정밀하고 정확한 용량의 시료를 취하여 분석하거나 처리할 때 사용되는 기구이다. 마이크로파이펫은 부피 측정이 정확하고 배관이 없어 오염의 우려가 적다는 장점이 있다. 마이크로파이펫의 사용 방법은 다음과 같다.
첫째, 마이크로파이펫의 부피 조절 노브를 돌려 원하는 부피를 설정한다. 부피 범위에 따라 종류가 다양하므로 목적에 맞는 파이펫을 선택해야 한다. 둘째, 파이펫의 팁을 시료 용기에 꽂고 천천히 부피를 흡인한다. 팁을 시료 용기 벽면에 가볍게 접촉시켜 표면 장력을 이용하면 더욱 정확한 양을 흡인할 수 있다. 셋째, 파이펫의 팁을 수용액이나 배지에 담그고 천천히 부피를 토출한다. 시료가 팁 끝에 떨어지지 않도록 주의해야 한다. 넷째, 사용 후에는 팁을 제거하고 파이펫을 깨끗이 세척한다.
이처럼 마이크로파이펫은 정밀한 부피 측정이 가능하여 실험 과정에서 필수적으로 사용되는 기구이다. 올바른 사용법을 익히면 실험 오차를 줄이고 재현성 있는 데이터를 얻을 수 있다.
2. 실험 방법
2.1. 혈장 분리
혈장 분리는 채취한 혈액으로부터 혈장을 분리해내는 과정이다. 혈액은 혈구와 혈장으로 구성되어 있는데, 혈장은 혈액 속의 유형성분인 적혈구, 백혈구, 혈소판 등을 제외한 액체성분으로 담황색을 띠는 중성의 액체이다. 혈장에는 생명유지에 필수적인 혈액응고인자, 전해질 등이 포함되어 있다.
혈장 분리를 위해서는 먼저 채혈한 혈액을 항응고제가 처리된 시험관에 넣어준다. 이때 항응고제로는 주로 헤파린, 옥살산, EDTA 등이 사용되는데, 이는 혈액응고를 방지하고자 함이다. 항응고제가 섞인 혈액 시험관을 원심분리기에 넣고 고속으로 회전시키면 혈구와 혈장이 분리된...
참고 자료
[네이버 지식백과] 혈액(blood), 두산백과
[네이버 지식백과] 혈장(blood plasma), 한국식품과학회, 식품과학기술대사전, 광일문화사(2008)
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[네이버 지식백과] 교정(calibration), 월간전자기술, 전자용어사전, 성안당(2007)
․血液學 최병진 고려의학
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