단백질 분리 생화학 리포트

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목차

1. 서론

2. 실험&결과
1) Materials
2) Methods

3. Result
1) IPTG induction.
2) SDS-Page 1.
3) SDS-Page 2.
4) Bradford assay.
5) UV method.
6) Lyophilization.

4. Discussion

5. Reference

본문내용

PDI( Protein Disulfide-Isomerase )라는 단백질의 정제를 목적으로 하는 이번 실험은 2014년 11월 03일로부터 시작해서 LB배지 만들기, 1차 seeding, 2차 seeding, IPTG induction, SDS Page, Cell lysis, Ni-NTA affinity chromatography, Dialysis, SDS Page, Bradford assay, Lyophilization 순으로 11월 19일까지 진행하였다.
단백질들은 각자의 분자적 기능( molecular function )과 세포적 기능( cellular function )을 수행한다. PDI는 세포적 기능으로서 소포체에 존재, 작용하며 분비 단백질의 이황화 결합 형성으로 단백질 접기( protein folding )에 관여한다. 또한 분자적 기능으로서 분자 chaperone으로서의 기능 또한 시사하고 있다. in vitro에서는 환원된 효소에 작용을 하여서 이황화물의 결합의 재조합에 의해 활성을 만들 수 도 있다.( 그림 1 ) 단백질 접기와 더불어 그 밖의 PDI의 세포적 기능은 MHC classⅠ molecules로 antigenic peptide를 저장하는데 도움을 주는 것과 HIV가 CD4 positive cells에 감염되는 동안에 HIV gp120 protein bonds를 파괴하는데 관련이 있는 등 밝혀진 여러 가지 생체 내에서의 기능들이 있다.

참고 자료

“Lac operon”,
http://www.namrata.co/lac-operon-regulation-of-gene-expression-in-prokaryotes/
“생장 곡선”, http://www.humantech2000.com/5892
“Acrylamide gel”, http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Acrylamide_gel.svg
“Ni-NTA”, http://www.nanoprobes.com/
“PDI”, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/?term=pdi+mouse
“분자량”, http://web.expasy.org/cgi-bin/compute_pi/pi_tool
Shawn O. Farrell. (1992) Experiments in Biochemistry. 533(1):p218