약품생화학 (전기영동,membrane transfer)

목차

1. 실험목적
2. 개념소개
3. 사용한 기구 및 시약 형태
4. 실험과정
5. 실험결과 및 고찰

본문내용

1. 실험 목적
단백질의 분리 및 정제과정 중 전압 기울기의 원리를 이용하는 전기영동 분석법은 실험자가 목표로 하는 단백질 즉 물질의 효능을 파악하기 위하여 세포내 신호전달물질이나 여러가지 단백질들의 구성을 파악하기 위한 근본적인 실험방법의 일부로서, 앞서 실험한 SDS-PAGE를 이용한 sample을 역시나 앞서 실험으로 얻어낸 전기영동 겔에 loading하여 직접 실험을 통해 sample내의 단백을 물리화학적 특성을 이용하여 분리해보는 것이 이번 실험의 목표이다.

2. 개념 소개 (이전 내용 포함)
① 전기영동
‘겔 전기 영동(Gel electrophoresis)’의 경우 이름에서 알 수 있듯이 전기를 이용한 분석 방법인데, 틀에 의해 제작된 폴리아크릴아마이드 젤을 이용한다. 폴리아크릴아마이드는 분자형태가 거름망같이 얽혀 있는 형태이며, 관찰하고자 하는 분자들을 거르는 과정을 통해 분리할 수 있다. 이때 폴리아크릴아마이드 젤을 제작할 때, 그 농도를 조절할 수 있는데, 이 농도가 높을수록 그 망의 촘촘한 정도가 높아진다.
이때, Gel electrophoresis의 경우 전기를 이용하는 만큼 해당 단백질의 전하 값 즉, pI값이 중요하다. pI값이란 분자가 전하를 갖는 상황에서, 해당 용매의 pH값을 변화시킬 때 알짜 전하의 값이 0이 되는 용매의 pH값을 말한다. 이것을 이용하면 해당 단백질의 특정한 환경에서의 pI값을 이용하여 마치 자석과 같은 원리로 단백질 표본을 겔 끝으로 밀어내고 잡아당길 수 있게 되며, 이 실험을 시행할 때, 해당 단백질의 전하, 크기, 모양 등이 영향을 줄 수 있기 때문에 해당 단백질의 정보를 알기 위한 ‘전처리’가 중요시되는 실험 중 하나이다.

② SDS-PAGE
‘SDS-polyacrylamide gel electrophoresis’로서 SDS라는 계면활성제의 종류를 사용하는 방법이다.

참고 자료

없음