[ 화공기초이론및실험2 A+ ] Lowry protein assay (단백질 정량 분석) 예비레포트

소개글

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목차

1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 실험 기기 및 시약
4. 실험 방법
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
효소를 포함한 단백질은 인체를 구성하는데 꼭 필요하므로 정확한 단백질의 양을 알아내는 것은 매우 중요하다. 단백질 정량분석이란 무엇이며, 어떻게 단백질 정량분석을 할 수 있는지 알아보고 각 분석법의 원리에 대해 이해한다. 단백질 정량 분석법 중 Lowry method를 이용해 여러 시료의 단백질 정량분석을 해본다. Uv-vis spectrometer 사용법을 익히고 결과 값을 토대로 검량곡선을 그리고 해석한다.

2. 바탕 이론
1) 단백질 정량분석
단백질 정량분석이란 미지의 시료에 들어있는 단백질의 양이나 단백질의 농도를 구하는 것을 말한다. 단백질은 우리 몸을 구성하는데 꼭 필요하며, 의약품이나 식품에 들어있는 효소와 같은 단백질을 정확하게 정량하는 것은 매우 중요하다. 특히 단백질 정량은 생화학 실험의 기본이 되는 준비단계인데 이때 잘못 정량하면 중간에 정확한 정량이 이루어졌는지 판단할 수 없고, 실험 결과가 잘못되기 때문이다. 단백질 정량분석 법에는 UV method, Lowry method, BCA, kjeldahl method, Opa method, Bradford method 등이 있다. 많은 정량분석 법 중 어떤 분석법을 사용할지는 검량시간, 감도, pH, 방해물질 등을 고려하여 알맞은 분석법을 선택해야 한다.

2) UV method
UV method 는 단백질에 들어있는 아미노산 중 tyrosine의 phenol group, tryptophan의 indole ring, phenylalanine 의 benzyl group 이 280 nm 를 흡수하는 성질을 이용해 UV-vis spectrometer 로 흡광도를 측정하여 단백질을 정량하는 법이다. 이 고리구조의 아미노산 외의 다른 아미노산은 자외선 흡수율이 낮기 때문에 단백질을 측정할 수 있다. 단백질 시료를 바로 측정할 수도 있고 특정 자외선 파장의 빛을 흡수하는 형광염료를 넣어 이 염료가 단백질과 결합하도록 유도하여 흡광도를 이용해 측정할 수도 있다.

참고 자료

이강일, “단백질 정량 실험을 위한 Bradford reagent 개발”, 바이오 세상, (2013)
김해신, 2014, “생화학 실험서 제2판”, 월드 사이언스, 44-51p
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“화공기초 이론 및 실험” 교재
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MSDS
전현숙, “단백질 정량을 위한 형광염료의 합성과 특성에 대한 연구”, 학위논문