[21-2] 연세대학교 공학/일반생물학및실험(2) A+ 레포트 - Ni-NTA agarose
- 최초 등록일
- 2022.04.07
- 최종 저작일
- 2021.11
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목차
1. Objective (목적)
2. Results (결과)
3. Discussion (실험의 해석)
4. Further study
본문내용
Objective (목적)
Ni-NTA agarose 수지를 이용한 단백질 정제와 다양한 크로마토그래피의 방법을 습득하는 것을 목표로 한다.
Results (결과)
이 실험은 pProExHta-HYL1 CDS 백터를 썼고 O.D.가 1.0인 상태에서 18C에 IPTG 0.3mM과 함께 overnight에 둔 뒤, 단백질을 Ni-NTA 레진 500μL, 각 fraction 별로 625μL를 사용해 정제했다. 다음 사진에서 우리는 #2 밴드가 가장 색이 옅고, 그 다음으로 #3과 #6번 밴드, 그리고 #4와 #5번 밴드가 가장 진한 것을 확인할 수 있다 (가장 좌측과 우측에 있는 밴드는 DNA ladder이다).
Discussion (실험의 해석)
이 실험은 affinity chromatography와 Ni-NTA agarose 수지를 이용해 원하는 특정 단백질을 정제하고자 하였다.
참고 자료
남상욱, 권혁빈, 2008, 유전공학의 이해, 라이프사이언스
Guengerich FP, Martin MV., 2006, Purification of cytochromes P450: products of bacterial recombinant expression systems. Methods Mol Biol.;320
Bio-Rad.com
https://ko.wikipedia.org/wiki/IPTG
NCBI, “Engineering Cells to Improve Protein Expression”, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4127093/, November 9th, 2021.
NCBI, “Native SDS-PAGE: High Resolution Electrophoretic Separation of Proteins With Retention of Native Properties Including Bound Metal Ions”, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4517606/, November 9th, 2021.
SinoBiological, “Fusion Protein”, https://www.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein, November 9th, 2021.