[생화학실험]단백질의 정량분석

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소개글

실험 과정은 다음과 같다.
1. Folin-Lowry법에 의한 단백질 정량
2. Bradford법에 의한 단백질 정량

본문내용

1. 실험 목적
가. Lowry method와 Bradford method를 사용하여 단백질(protein)의 농도를 측정한다.

2. 실험 이론 및 원리
가. 단백질
20종류 아미노산들의 한쪽 아미노기와 다른 쪽 카르복실기가 탈수 축합을 통해 화학결합을 형성한 것을 펩티드라 부르며, 단백질은 일반적으로 100개 이상의 많은 아미노산이 펩티드결합으로 결합되어 펩티드 사슬(Polypeptide chain)을 이룬다.

나. 단백질의 정량
시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로 280 ㎚에서 흡광도를 측정하는 방법과 단백질의 농도에 따른 색의 변화를 이용하여 분석하는 방법이 있다. 색의 변화를 이용하는 비색정량분석 (colormetric analysis)에는 Bradford법, Biuret법, Lowry법, Bicinchoninic acid법 등이 있다. 280 ㎚의 파장에서의 흡광도 측정 방법은 tyrosine이나 tryptophan 잔기의 흡광도를 측정하는 방법으로 장점으로는 분석이 빠른 것을 들 수 있으며, 단점으로는 tryptophan의 함량 변화에 따라 흡광도가 틀려지고 같은 파장의 빛을 흡수하는 용액 내의 다른 성분들(예; 핵산)의 오염을 들 수 있다.

참고 자료

식품의약품안전처 단백질정량(로리)법 매뉴얼
생화학 분자생물학 실험서, 범문에듀케이션, 김준, 2011.01.03., p.16∼25

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