[생화학실험]단백질 정량(Lowry 법)

소개글

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목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 토의 사항

본문내용

1. 실험 목적
가. 어수리의 추출 희석액으로부터 어수리의 단백질을 Lowry법으로 정량한다.

2. 실험 이론 및 원리
가. Lowry법
알칼리성에서 단백질의 peptide 결합과 구리가 반응하여 Cu ^{2+} 이온을 생성하는 Biuret 반응의 원리를 이용한 것이다. 발색의 정확한 기작은 밝혀지지 않았지만 Cu ^{2+} 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 phospomolybdotungstate를 푸른색의 heteropolymolybdnum으로 환원시킨다. 이러한 반응 결과 강한 푸른색을 생성하며 그 강도는 tryptophan과 lysine양에 영향을 받는다. 이 방법은 단백질의 농도가 0.01～1.0㎎/㎖의 경우에 측정가능하다.

나. Biuret 반응
두 개 이상의 펩티드 결합을 갖는 화합물들은 알칼리성 용액에서 황산구리로 처리하면 자주색을 띠는 물질을 생성한다. (색깔은 구리 원자와 2개의 펩티드 사슬에서 오는 4개의 질소 원자들 사이에서 배위 화합물이 생기는 것으로 생각되고 있음) 수산화나트륨을 처리하는 이유는 ?OH에 의해 아미노기에 있는 수소 이온이 제거되어 구리 이온과 결합할 수 있도록 하기 때문이다.

참고 자료

없음