Protein purification 단백질정제

목차

1. Sample 준비 및 Stock solution 제조
2. Salting out(염석)
3. Dialysis(투석)
4. Electrophoresis, Absorbance, Staining

본문내용

실험 방법
1) 생리식염수(0.9% NaCl)와 TE buffer (pH 7.4)를 제조한다.
→ 생리식염수(0.9%　NaCl) 500ml 만드는 법
증류수를 먼저 넣고 0.9% NaCl 4.5003g을 넣고 나머지 증류수를 넣어 총 volume을 맞춰준다.
2) TE buffer (pH 7.4) 제조 방법
→ TE (pH 7.4) buffer (10mM Tris-HCl (pH 7.4) + 1mM EDTA (pH 8) 100mL 만드는 법
➀ 0.1M Tris-HCl (pH 7.4) 100ml
- 1M : 만들고자 하는 M = 분자량(g) : 필요한 양(g) 식을 이용하여 0.1M Tris 양을 구한다. 그리고 증류수를 먼저 넣고 0.1M Tris를 계산하여 넣고 HCl을 이요하여 pH를 맞춰준 뒤 나머지 증류수를 넣어 총 volume을 맞춰준다.
→ 1000 : 121.14 = 100 : χ , 0.1M Tris=1.2114
➁ 0.4M EDTA (pH 8)
- 미리 만들어 놓은 stock solution을 이용, 증류수를 먼저 넣고, 0.4M EDTA를 계산하여 넣고 NaOH를 이용하여 pH를 맞춰준 뒤 나머지 증류수를 넣어 총 volume을 맞춰준다.

참고 자료

없음