포항공대 화학생명공학실험[포스텍 A]Final-Report(Protein Purification & Quantification)

소개글

포항공대 화학공학과 전공필수 과목인
화학생명공학실험 보고서입니다
PRE-Report 는 실험전 사전지식을 정리하는 보고서이고
Final-Report는 실험후 결과를 정리하는 보고서 입니다.

두가지를 모두 참고하셔서 과제에 도움이 되시길 바랍니다.

목차

1. 실험 제목

2. Data 및 결과

3. 토의
1) 왜 purification 과정에서 filtering되는 용액의 색이 변하는가?
2) sample의 농도 값은 무엇인가?
3) 왜 standard와 차이가 나는가?

4. 결론

본문내용

1. 실험 제목
Protein Purification & Quantification

2. Data 및 결과
위의 표는 4개의 standard와 우리가 실험한 3개의 sample의 정보가 담겨있다. 각 standard와 sample는 세 번씩 측정하여 평균값을 얻었다. 증류수와 단백질은 합쳐서 800λ 로 일정하게 맞추고 Bradford reagent는 200 λ 를 넣어 총 1ml로 맞춰주었다. 실험 결과, standard 와 sample 모두에서 protein의 함량이 높을수록 흡광도가 증가하는 경향을 볼 수 있다. 우리가 직접 실험한 sample과 standard를 비교해보면 sample 의 흡광도가 약간 낮은 것을 확인 할 수 있다(standard 의 85%정도). 표준편차는 대부분 0.01 보다 작은 값이 나왔다.

Standard 를 이용하여 그래프를 그려본 결과 다음과 같은 그래프를 얻을 수 있었다. 기울기0.0268 에 y절편 0.2911, R제곱 값 0.9965의 선형그래프를 도출했다. R제곱 값이 거의 1에 근접하기 때문에 완벽에 가까운 선형그래프라고 볼 수 있다.
단백질의 정제과정에서는 처음 평형을 만들어 줄 때 투명한 용액이 tube 밑으로 흘러나왔다.

참고 자료

Sambrook et al Molecular Cloning 3rd Ed. Vol.1, Chapter 2
Jeremy M. Berg et al Biochemistry 5th Ed. Chapter 4
Robert K. Scopes, Protein purification 2nd, 100p ~ 140p, 187p ~ 208p