bradford 분석법에 의한 미지 단백질 시료의 정량
- 최초 등록일
- 2009.11.04
- 최종 저작일
- 2009.10
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소개글
단백질의 빠른 정량을 위해서 일반적으로 사용되는 방법은 흡수분광법이다. 흡수분광법은 분자의 구조와 환경에 의해 광의 파장과 능률이 정해지는 성질을 이용한다. 강도 I0의 광이 두께 d cm 에서 몰농도 c (mol/L)의 물질을 통과해 나오는 광의 강도 I는 다음의 Lambert-Beer`s의 법칙을 따른다.
여기에서 ε는 몰흡광계수이다. 실제로 Beer의 법칙은 높은 농도(보통>0.01 mol/L)의 시료에서는 시료용액에 존재하는 각 입자들이 이웃한 입자의 전하 분포에 영향을 주므로 해서 흡수화학종 입자 사이에 평균거리가 줄어든다. 이러한 상호작용은 복사선의 일정 파장을 흡수하는 입자의
목차
1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험원리
4. 재료 및 기구
본문내용
1. 실험제목
Bradford 분석법에 의한 미지 단백질 시료의 정량
2. 실험목적
Bradford 분석법을 이용하여 미지 단백질 시료의 정량분석을 통하여 미지 단백질 시료를 파악할 수 있다.
3. 실험원리
단백질의 빠른 정량을 위해서 일반적으로 사용되는 방법은 흡수분광법이다. 흡수분광법은 분자의 구조와 환경에 의해 광의 파장과 능률이 정해지는 성질을 이용한다. 강도 I0의 광이 두께 d cm 에서 몰농도 c (mol/L)의 물질을 통과해 나오는 광의 강도 I는 다음의 Lambert-Beer`s의 법칙을 따른다.
여기에서 ε는 몰흡광계수이다. 실제로 Beer의 법칙은 높은 농도(보통>0.01 mol/L)의 시료에서는 시료용액에 존재하는 각 입자들이 이웃한 입자의 전하 분포에 영향을 주므로 해서 흡수화학종 입자 사이에 평균거리가 줄어든다. 이러한 상호작용은 복사선의 일정 파장을 흡수하는 입자의 능력을 변화시켜서 홉광도와 농도사이의 직선관계를 벗어나게 한다. 따라서 Beer의 법칙이 잘 들어맞는 적절한 농도범위의 기준용액을 만들어서 미지 시료의 농도를 분석할 수 있다. 이러한 흡수분광법에 의한 단백질 정량에 사용되는 광의 파장은 자외선영역과 가시광선영역으로 나뉜다.자외선영역에서의 흡수 분광법은 단백질에 포함되어있는 tryptophan, tyrosine, phenylalanine이 갖는 흡수를 280nm에서 정량하는 방법이다.
참고 자료
없음