lowry protein assay (단백질 정량 분석) 예비레포트

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목차

1. 실험 목적

2. 바탕 이론
1) 단백질 정량 분석
2) UV method
3) Lowry method
4) BCA method
5) Bradford method
6) BSA
7) error bar

3. 실험 기기 및 시약
1) UV/Vis spectrophotometer
2) 마이크로 피펫
3) lowry reagent , Follin&Ciocalte Phenol reagent

4. 실험 방법

본문내용

1. 실험 목적
단백질을 정량화 하여 분석하는 UV법, Lowry법, BCA법, Bradford법 등에 대해 알아보고 Lowry method를 이용하여 다양한 농도의 단백질 시료를 정량한다.
또한, UV/Vis spectrophotometer 이용 방법에 대해 배우고 그것을 통해 단백질 용액의 흡광도를 측정한다.

2. 바탕 이론

(1). 단백질 정량 분석

먼저, 정량 분석이란 물질을 구성하고 있는 성분의 함량을 정확히 알 수 없을 때 기기 또는 화학 분석을 통하여 정확하게 구성 성분의 양을 측정하는 일을 의미한다.
단백질 정량 분석을 통해 시료나 용액 속에 포함된 단백질의 양이나 농도를 구할 수 있고 UV법, Lowry법, BCA법, Bradford법 등 다양한 분석 방법들이 사용된다.

(2). UV method

UV method는 UV/Vis spectrophotometer를 이용해 흡광도를 측정하여 단백질의 농도를 구하는 원리의 방법이다.
단백질은 많은 아미노산으로 구성되있고, 그 중 방향족 아미노산인 Phenylalanine,
Tyrosine, Tryptophan이 275 ~ 280nm의 자외선을 흡수 하기 때문에 280nm의 파장일 때의 흡광도가 단백질의 농도와 비례하다는 원리를 이용한다.
UV method의 특징은 쉽고 빠르게 측정이 가능하며 측정하는 과정에서 단백질이 변성하지 않기 때문에 그 단백질을 재사용할 수 있다는 장점을 가지고 있다.
하지만 아미노산의 조성에 따라 값이 달라질 수 있는 단점을 가지고 있고 주로 정확한 양의 측정보다 상대적인 양이나 존재의 유무를 측정하는데 사용된다.

(3). Lowry method

Lowry method는 시료용액과 표준용액에 발색 시약을 가했을 때 보여지는 색의 농도와 색조를 비교해 특정 성분의 농도를 정량하는 정량법이다.

참고 자료

화공기초이론및실험2 ,실험노트, 6-7
Daniel C. Harris, 2012, 분석화학 제8판, p.9, p.442~p.445
조봉희 외2명, “UV-분광광도법과 전기영동에 의한 피마자 유식물에서 저온처리에 의한 당류 함량과 단백질 구성의 분석”
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