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Lowry protein assay(단백질 정량 분석) 예비레포트

emog
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최초 등록일
2024.01.08
최종 저작일
2021.10
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목차

1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 실험 기기 및 시약
4. 실험 방법
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
UV method, Lowry method, BCA method, Bradford method 등 다양한 단백질 정량 분석 방법에 대해 이해한다. 이번 실험에서는 그 중에서 Lowry method로 다양한 농도의 단백질 시료를 정량한다. 또한, UV/vis spectrophotometer(UV/vis 분광광도계) 이용 방법을 숙지하여 단백질 시료 용액의 흡광도를 측정한다.

2. 바탕 이론
(1) 단백질 정량 분석
정량 분석이란 어떤 시료 중 성분 물질의 양 또는 비율을 알기 위한 화학 분석법의 총칭으로, 성분 물질의 양적 관계를 분석하지 않고 그 물질의 원소 번호 또는 화학 구성물을 알아내는 것을 목적으로 하는 정성분석과 차이가 있다. 보통 정성분석을 통해 성분 물질에 대해 알고 정량 분석을 시행하여 그 양을 알아낸다. 여기서 단백질 정량 분석이란 측정하고자 하는 시료 내의 구성물질 중 특히 단백질의 양 또는 농도를 알기 위한 분석법이다. 단백질 정량 분석에는 UV method, BCA method, Bradford method와 이번 실험에서 시행할 Lowry method가 대표적이다.

(2) UV method
분광학적으로 단백질 정량 분석을 하는 방법이다. cuvette에 미지 시료를 담아 UV/vis spectrophotometer에 넣어 빛을 쏘면 흡광도를 측정하고, 물질의 농도와 흡광도는 비례한다는 비어의 법칙에 의해 그 물질의 농도를 알아낼 수 있다. 단백질은 단백질 1차 구조의 트립토판, 티로신, 페닐알라닌 즉, 방향족 아미노산이 있기에 흡광도를 측정할 수 있다. 트립토판은 280nm, 티로신은 274nm, 페닐알라닌은 257nm에서 최대 흡광도를 갖는다. 즉, 단백질은 1차 구조에 존재하는 방향족 아미노산에 의해 280nm에서 최...

참고 자료

2021 “화공기초이론및실험2” 실험노트
안전보건공단 화학물질 정보, MSDS
전현숙, "단백질 정량을 위한 형광 염료의 합성과 특성에 대한 연구."(2004)
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