Ligation의 원리

*병*

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Ligation의 원리

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♤Ligation
-Ligation은 문자 그대로 DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어이다. 이 반응에 이용되는 효소를 ligase라 하며 DNA를 기질로 사용하는 ligase를 DNA ligase, RNA를 기질로 사용하는 ligase를 RNA ligase라 한다. RNA ligase는 single strand의 DNA 또는 RNA 끼리 연결해 주는 효소로 5`-RACE와 같은 특수한 목적의 실험에서 사용될 수 있다.
DNA의 ligarion 과정을 예로 들면 다음과 같다. vector와 cloning 시킬 DNA를 BamHⅠ과 같은 cohesive end를 만드는 제한효소로서 절단한 후 혼합하면 절단된 말단에서 염기끼리 결합하여 복원되는 상태가 된다. 이것에 DNA ligase를 작용시키면 끊어진 점이 연결되어 재조합 DNA가 생긴다. 이 경우 동일한 제한효소 절단부위가 재생된다. 이 재조합 plasmid를 대장균에 넣어 cloning한 후 다시 같은 제한효소로서 절단하면 vector와 passenger DNA 단편으로 분해되어 이후의 해석과 조작에 편리하게 된다.

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