Lowry 방법에 의한 단백질 정량 실험 보고서
- 최초 등록일
- 2013.03.12
- 최종 저작일
- 2011.05
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목차
1. 제목
2. 개요
3. 서론
4. 재료 및 방법
5. 결과 및 고찰
6. 참고문헌
본문내용
1. 제목 : Lowry 방법에 의한 단백질 정량
2. 개요
농도가 알려져 있지 않은 시료의 단백질 농도를 Lowry방법에 의하여 구하여 본다.
그리고 표준곡선을 만든 후, 미지의 시료 농도를 구한다. 조원의 실수로 미지의 시료를 엎어버리는 바람에 시료의 농도를 구하지 못하였다.
3. 서론
※목적 : 농도가 알려져 있지 않은 시료의 단백질 농도를 Lowry방법에 의하여 구한다.
※실험배경
① 단백질 정량이란?
단백질 정량이란 sample 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로써, 대부분의 생명과학실험의 기본이 되는 과정이라고 할 수 있다. 생물학 분야의 경우 다른 분야보다 결과를 볼 때까지 뭔가 잘못되었다는 것을 알기 어려워, 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘 못 이루어지면 헛수고를 하거나 잘못된 결과를 얻을 수 있다. 이러한 이유 때문에, 단백질 정량을 정확하게 하는 것은 매우 중요하다. 또한, 정확성 뿐 만 아니라, 대부분의 실험에서 반복적으로 사용하게 되므로, 간편성 역시 중요하게 여겨지지 때문에, 실험에 따라서 다양한 단백질 정량 방법이 사용되고 있다.
-단백질 정량법에는 크게 Clolorimetric 방법과 Eectrophoresis 방법이 있는데, 대부분 Colorimetric(비색법) 방법을 사용한다.
Colormetric → Standard curve(포준검량곡선)
Stadard protein(표준검량물질): BSA(Bovine Serum Albumin-소혈청단백질)
② Lowry방법
이 방법은 단백질 사슬의 아미노산에서 구리이온(+2)의 아마이드 결합으로 환원(+1)되는 정도를 측정하는 방법이다. 이 Lowry 방법에서 사용하는 Folin-Ciocalteau시약에 의한 발색은 뷰렛 시험에서와 마찬가지로 단백질과 알칼리성 구리와의 반응과 포스포몰리브덴산-포스포텅스텐산 염들이 단백질에 있는 티로신과 트립토판들에 의해서 환원되는 과정에서 단백질의 양에 비례하여 그 착색정도가 커진다.
-장점: 반응의 색이 보다 강하게 나타나므로 감도가 높아 Bradford 보다 더 정확하다고 여겨진다. 5㎍/㎕의 낮은 농도까지 측정할 수 있어서 널리 쓰인다.
참고 자료
http://blog.naver.com/nango0o/140072058692
http://blog.naver.com/akajay?Redirect=Log&logNo=60077853375