Bradford 단백질 정량법

소개글

실험제목 : 단백질 정량법(Bradford 법)
목 적 : 용액에 존재하는 단백질의 양을 알기 위하여 여러 방법을 이용하여 정량을 하는데, 그 중 하나인 Bradford 법을 익힌다.
재 료 : Bradford 염료 시약(Coomassie Brilliant Blue G-250 dye, phosphoric acid, methanol의 혼합물), Bovine serum albumin(BSA), 분광광도계, 큐벳, e-tube, vortexer

목차

실 험 일
실험제목
목 적
재 료
실험방법
결과 및 토의

본문내용

실험제목 : 단백질 정량법(Bradford 법)
목 적 : 용액에 존재하는 단백질의 양을 알기 위하여 여러 방법을 이용하여 정량을 하는데, 그 중 하나인 Bradford 법을 익힌다.
재 료 : Bradford 염료 시약(Coomassie Brilliant Blue G-250 dye, phosphoric acid, methanol의 혼합물), Bovine serum albumin(BSA), 분광광도계, 큐벳, e-tube, vortexer
실험방법 : BSA 1㎍, 2.5㎍, 10㎍, 15㎍, 25㎍을 각각 e-tube에 넣은 후, 증류수를 800㎕까지 채운다. Bradford 염료 200㎕를 넣고 vortex한 후, 상온에 5분간 방치한다. (이 때, 반응 시간이 초과하면 흡광도가 증가 될 수 있으므로 주의한다.)595㎚에서 흡광도를 측정 한 후, 표준곡선을 그린다. 그 뒤 주어진 미지의 농도의 BSA 10㎕를 e-tube에 넣고 증류수를 800㎕까지 채운다. Bradford 염료 200㎕를 넣고 voltex한 후, 상온에 5분간 방치한다. 595㎚에서 흡광도를 측정한 후, 표준곡선을 이용하여 시료의 단백질 양을 구한다.
결과 및 토의
그래프의 R2값이 0.9935로 신뢰할 만 하다.
추세선 그래프 방정식이 y = 0.0356x + 0.7525로 나왔으므로
실험값 0.784를 Y에 대입하면 BSA는 0.885㎍가량 나온다

참고 자료

없음