실험실습보고서_ Agarose gel 전기영동

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목차

1. 생명공학 기초실험I 실험실습 보고서 (1)
1) 실험주제 및 목표
2) 사용한 실습장비
3) 실험원리
4) 실험과정

2. 생명공학 기초실험I 학습활동보고서 (2)
1) 실험결과
2) 고찰
3) 좋았던점
4) 아쉬웠던점 (건의사항)

본문내용

실험주제 및 목표
아가로스를 이용하여 미지의 DNA를 분리하고 분석한다.
Agarose gel 을 직접 만들 수 있다.

사용한 실습장비
Agarose gel, EtBr, Agarose, UV transilluminator, 비커, measuring cylinder, micropipette, tip, DNA sample, Loading dye, casting tray, 전자레인지, comb, well, TAE buffer, 플라스크

실험원리
전류를 흘러주면 음전하를 가진 DNA가 두 전극 사이에서 +극 쪽으로 이동하는 원리이다.

실험과정
[1] Agarose gel 전기영동
1. Loading dye를 한 tube 당 10ul 씩 DNA sample(P, PR, S) 에 넣어준다.
*Loading dye를 첨가하는 이유*
➀Loading dye: 전기영동 시 샘플과 함께 섞어 내리는 염료
➁샘플에 밀도를 추가하여 DNA가 buffer 속에 확산되지 않고, 밑으로 가라앉을 수 있 도록 한다.
➂색상을 제공하여 DNA의 위치를 한눈에 알아볼 수 있게 한다.

2. 각자 조원들은 1kb, 100bp, P, PR, S를 5ul로 왼쪽, 오른쪽 agarose gel의 상단 홈에 각각 넣어준다. (조원 모두 왼쪽, 오른쪽 각 한 번씩 실시)
3. 전원장치를 100V로 60분 설정해준다. (running:전기장을 걸어주고 띠가 나올 때 까지 기다림/ 전압이 높을수록 이동이 빠르다.) ->DNA가 크기 별로 분리된다.
4. 노란색 line이 끝부분에 도달할 때까지 10분 간격으로 관찰한다.
5. UV light를 이용하여 전기영동 결과를 확인한다.

[2] Agarose gel 만들기
1. TAE buffer에 파우더 형태의 아가로스를 정해진 농도로 넣는다. (25ml buffer를 0.8% 농도로 만들어야함 = 0.2g의 아가로스 파우더 필요)

참고 자료

없음