유전물질 전기영동 생화학 실험 및 보고서

목차

1. 실험목적
2. 원리 및 이론
3. 실험방법
4. 결과 분석 및 설명
5. 결과에 대한 고찰
6. 참고자료

본문내용

실험목적
- 실습에 사용할 완충용액 제조 및 pH 측정
- 전기영동방법의 원리와 특성을 이해하고 Agarose gel을 통해 CT DNA를 농도별 band 모양을 관찰하고 분석하여 비교해 본다.

원리 및 이론(시약에 대해 조사)
- 이론 (시약에 대해 조사)
① Trizma base :
유명한 시약회사인 Sigma에서 만드는 Tris의 상표명이다. Buffer의 대명사인 Tris는 주로 약 알칼 리에서 buffering을 하는 염기성 버퍼이다. 그래서 tris를 tris base 라고 한다. 그러나 tris와 tris base는 같은 것이다. 분자식은 (HOCH2)3CNH2이고 분자량은 121.14이며 물에 약 2.4M 농도까지 녹는다.

② Boric acid :
산화붕소가 수화되어 생기는 산소산으로 오쏘붕산, 메타붕산, 사붕산 등이 있으며 보통 오쏘붕산 을 가리킬 때가 많다. 오쏘붕산은 붕규산유리, 도자기의 유약 등의 원료가 되며, 주사제의 용해를 촉진시키기도 한다.

③ EDTA :
4개의 카복실산염과 2개의 아민기를 매개로 하여 금속과 결합하는 무색의 결정성 가루이다. 거의 모든 금속이온과 수용성 킬레이트를 만드는 특징을 갖고 있어 분석화학에서 널리 응용되고 있다.

④ ddH2O :
deionized distilled water를 의미하는데, 사용할 물을 membrane filter(막 여과기)로 여과한 후에 물속에 존재하는 이온을 제거하고 다시 이 물을 증류시켜 만든 순수한 물을 뜻 한다. 일반적인 물은 깨끗해 보여도 아주 작은 크기의 불순물이나 양이온, 음이온 그리고 세균 등이 존재하기 때 문에 정밀한 실험을 위해서는 이러한 것들의 영향요인을 제거하기 위해서 ddH2O가 사용된다.

⑤ Agarose :
한천 중에 다량으로 함유되어 있는 다당류로서, D-갈락토오스와 3, 6-안히드로-L-갈락토오스의 교대 중합물. 친수성이므로 고정화 효소 운반체와 어피니티 크로마토그래피 운반체 등, 수계에서 사용하는 지지체에 널리 이용되고 있다.

참고 자료

HIGH TOP 화학2 3권 화학반응 / 김봉래, 김득호 / 2003 / 두산동아 / 200p - 완충용액
화학 제 3 판 / 김윤수 / 1993 / 의학문화사 / 290 ~309 p - EtBr의 staining 원리, Agarose gel
기초 생화학 분자 수준의 생명 제 2판 2권 / Donald Voet Judith G. Voet Judith G. Voet Charlotte W.Prat / 2007 / 자유아카데미 / 26 ~ 29 P - 완충용액, pH측정