RNA extraction

목차

Ⅰ. Introduction
1. 실험 목적
2. RNA
3. RNase
4. RNA extraction
5. Caco2 cell

Ⅱ. Materials & Methods
1. Materials
2. Methods

Ⅲ. Results

Ⅳ. Discussion

본문내용

1. 실험 목적: 인간의 대장균 세포주인 Caco2 cell에서 RNA를 추출하여 전기영동을 통해 확인하여 본다.

2. RNA
RNA 또는 Ribonucleic acid는 오탄당의 일종인 ribose를 기반으로 뉴클레오타이드를 이루는 핵산의 한 종류이다. 하나의 나선이 길게 꼬여 있는 구조를 지니며 DNA의 일부가 전사되어 만들어진다. RNA는 단백질을 합성하는 과정에 작용하며 일부 바이러스는 DNA 대산 RNA를 유전물질로 갖기도 한다. 핵염기로 DNA와 달리 티민 대신 우라실을 갖는다.
RNA는 크기 rRNA, tRNA, mRNA로 구분할 수 있다. rRNA는 핵 안의 인에서 transcription되며 단백질과 합쳐 ribosome을 구성하게 된다. 이렇게 합성된 ribosome은 세포질에서 단백질 합성에 관여하게 된다. 진핵세포의 경우 28s, 18s, 5.8s, 5s의 rRNA가 알려져 있다. tRNA는 합성되는 폴리펩타이드 사슬에 아미노산을 전달하는 역할을 한다. 50여 가지의 종류가 있고 이들은 20종의 아미노산을 특이적으로 결합하여 전달한다. mRNA는 DNA의 한 가닥에 대해 상보적으로 전사되며 이들의 염기 결합순서에 의해 단백질의 아미노산 결합 순서가 결정된다. 이 중 인간 세포의 RNA중 75~80%가 rRNA이고 10~15%가 tRNA이며 다만 5~10%가 mRNA이다. 비록 mRNA가 소량이지만 mRNA의 끝은 poly A로 되어 있기 때문에 상대적으로 분리하기 편리하다. Poly T가 들어있는 크로마토그래피판에 통과시키는 방법으로 mRNA를 분리할 수 있다.
RNA는 2’end와 3’end가 hydroxyl group으로 이루어진 ribose를 단위로 하여 이루어진 물질이므로 DNA에 비해 반응성이 높다. 그리고 phosphate와 ribose 사이의 diester bond를 가수분해 시키는 효소인 RNase에 의해 쉽게 분해된다.
또한 DNA는 알칼리에서 안정하나 RNA는 알칼리 조건에서 가수분해가 일어나서 조각난다.

참고 자료

Lehninger Principles of Biochemistry -4th Edition. Freeman
유전공학의 이해 / 남상욱,권혁빈 / 라이브사이언스 / 2008
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