유전자 클로닝 (Gene cloning) 실습결과보고서

소개글

"유전자 클로닝 (Gene cloning) 실습결과보고서"에 대한 내용입니다.
안녕하세요, 유전자 클로닝에 대한 내용을 정리한 보고서입니다.
유전자 클로닝의 정의와 실험과정에 대한 내용이 자세히 기술되어있으니 보고서 작성 하시는 분들이 참고하시면 도움 많이 되실거에요.
위 자료 참고하셔서 좋은 점수 받으세요!
좋은하루 되세요 :)

목차

1. Gene cloning 1
I. 실습 내용 및 방법
II. 결 과
III. 고 찰

2. Gene cloning Ⅱ
I. 실습 내용 및 방법
II. 결 과
III. 고 찰

본문내용

실습 내용 및 방법

Gene Cloning
목적 : 특정 DNA를 분리하여 Vector에 Cloning 하여 숙주세포 내에서 대량으로 복제시킬 수 있는 분자 생물학적 기법

Material : Vector : pGEX 4T-1
Insert : T / eGFP
Restriction Enzyme : EcoRI, SalI
Agarose Gel 0.8%
MEGA quick-spin™ Total Fragment DNA purification Kit
T4 Ligase

<중 략>

실습 내용 및 방법

목적 : 특정 DNA를 분리하여 Vector에 Cloning 하여 숙주세포 내에서 대량으로 복제시킬 수 있는 분자 생물학적 기법
Ⅰ.Competent cell preparation
- Transformation 하기 전 정상적인 bacterial 화학처리를 한 competent cell을 만들어 DNA가 잘 들어 갈수 있게 만드는 과정을 말함

a. Seed culture

b. Main culture until O.D.6000.4 ~ 0.48
-가장 활발하게 자라는 시기
- Main culture : seed culture 에서 자란 e.coli의 1%를 추출.

c. On ice, 30 min - 성장을 정지시킴

d. Cell down - 4500RPM/10min/using high centrifuge.
- cell down을 하게 되면 다이아몬드 모양으로 형성됨

e. Add ½ vol(LB) 0.1M CaCl2 (15ml) and suspend.
- CaCl2에서 Ca++ 이 DNA에 붙는다.

f. Store in ice - 30min.

참고 자료

http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=435566&cid=42411&categoryId=42411 네이버 <블로그>
네이버 <블로그> http://qkr00ks.blog.me/90161762799