단백질 정량 분석-예비

목차

1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 실험 기기 및 시약
4. 실험 방법
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
UV법, Lowry법, BCA법, Bradford법 등 다양한 단백질 정량 분석 이론과 방법에 대해 알아본다. 그리고 Lowry법을 이용하여 다양한 농도의 단백질 시료를 정량해본다.
UV/Vis spectrophotometer 이용 방법을 잘 숙지한 후 단백질 용액의 흡광도를 측정하여 단백질의 농도를 구하는 것이 이번 실험의 목적이다.

2. 바탕 이론
1) 단백질 정량 분석
단백질 정량 분석이란 미지의 용액에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 구하는 과정을 말한다. 단백질 정량 방법에는 UV method, Lowry method, BCA method, Bradford method이 있다.
이번 실험에서는 Lowry법을 이용하여 다양한 농도의 단백질 시료를 정량해본다.

2) UV method
UV method는 어떤 시약도 사용하지 않고 UV/Vis spectrophotometer를 이용하여 흡광도를 측정하여 단백질의 농도를 구하는 것이다.
단백질은 수많은 아미노산의 결합으로 이루어져 있는데, 그 중 방향족 아미노산인 Phenylalanine, Tyrosine, Tryptophan에 의한 280nm에서 최대 흡광을 이용한 방법이다. 이 3가지 아미노산에 있는 벤젠 고리가 280nm 근처의 파장의 빛을 잘 흡수하기 때문이다. 따라서 UV/Vis spectrophotometer에서 280nm의 파장을 이용하여 흡광도를 측정하여 단백질의 농도를 확인할 수 있다. 0.05~2mg/ml 정도의 단백질이 있어야만 측정이 가능하다.
시약을 사용하지 않고 빠르고 쉽게 정량가능하고, 단백질 변성이 없는 장점이 있다. 하지만 단백질은 수많은 아미노산으로 이루어져 있어 아미노산 조성에 따라 흡광도가 달라져 정확도가 떨어진다. 정확한 양을 알기보다는 상대적인 양 또는 존재의 유무를 확인할 때 쓰인다.

참고 자료

화공기초이론실험2 실험노트”
google (단백질 정량 강의자료)
http://www.virtual-lab.or.kr/demo/Experiment_PnP.asp?gCNum=10202
https://m.blog.naver.com/PostList.nhn?blogId=withcoffee67
https://www.labome.com/method/Protein-Quantitation.html
http://blog.naver.com/ynh1205/130154439600