Lowry protein assay-예비레포트

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목차

1. 실험목적

2. 바탕이론
(1) 단백질 정량 분석 (Quantitative analysis of protein)
(2) Lambert-beer’s law
(3) BSA (Bovine Serum Albumine)
(4) UV method
(5) Lowry method
(6) BCA method (Bicinchoninic acid method)
(7) Bradford method

3. 기구 및 시약
(1) 실험 기기
(2) 시약
(3) 시약 제조

4. 실험방법

5. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
(1) UV법, Lowry법, BCA법, Bradford법 등의 단백질 정량 분석 방법에 대해 이해
(2) Lowry method를 이용하여 다양한 농도의 단백질 시료를 정량
(3) UV/vis spectrophotometer 이용 방법에 대해 숙지하여 단백질 용액의 흡광도 측정

2. 바탕 이론
(1) 단백질 정량 분석 (Quantitative analysis of protein)
단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정을 말한다.
단백질 정량 분석에 사용되는 방법에는 UV method, BCA method, Lowry method, Bradford method 등이 있다.

(2) Lambert-beer’s law
Lambert-Beer’s law는 흡광도는 빛이 지나가는 시료층의 두께에 비례한다는 Lambert’s law와 흡광도는 빛이 지나가는 시료의 농도에 비례한다는 Beer’s law를 더한 법칙으로써 으로 표현할 수 있다. 시료의 농도 c는 주로 mol/L(M)의 단위를 사용하고 빛의 통과 거리 b는 흔히 cm단위를 사용한다. ℇ은 몰흡광 계수(molar absorptivity)라고 하며, 단위는 (L/cm․mol)이다. 따라서 의 곱은 단위가 없게 된다. 몰흡광 계수는 특정 파장의 빛을 얼마나 흡수하는가를 나타내는 물질의 고유 특성이다.
이 법칙은 흡광도가 흡광 화학종의 농도에 비례한다는 것을 나타낸다. 이 법칙은 단색광 복사에 적용되고, 대부분의 물질들의 경우 묽은 용액에서는 잘 적용된다. 진한 용액에서 용질 분자들은 가까이 있기 때문에 서로 영향을 미친다. 용질 분자가 서로 가까이 있으면 그들의 성질은 약간 변한다. 매우 높은 농도에서 용질은 용매가 된다. 분자의 성질들은 용매에 따라 변하기 때문에 용액 중에서 빛을 수하지 않는 용질들은 흡광 화학종과 상호작용을 하여 흡광 계수를 변화시킨다.

참고 자료

안전보건공단 화학물질정보 - www.msds.kosha.or.kr
김해신, 2014, “생화학 실험서 제2판”, 월드사이언스, p45-48