Lowry assay

목차

1. 실험제목 (Subject)
2. 실험원리(Principium)
3. 실험재료 및 기구 (Materials and Apparatus)
4. 실험방법 (Methods)
5. 실험결과 (Results)
6. 고찰 (Discussion)

본문내용

1. 실험제목 (Subject)
- Lowry법에 의한 단백질 정량

2. 실험원리(Principium)
-정량분석(quantitative analysis): 물질을 구성하는 양적 관계를 명확하게 하는 분석법의 총칭이다. 일반적으로 정성분석에 의해 물질을 구성하고 있는 성분을 알고 난 다음 정량분석이 행해진다. 분석방법에 의해 분류하면 물리화학적인 기계, 기구를 사용해서 수행하는 기기분석과 화학반응을 이용해서 성분의 양을 결정하는 화학분석으로 크게 나뉜다. 화학분석은 조작법에 의해 분류하면 중량분석과 용량분석이 있다.

-단백질의 정량: 단백질을 정량한다는 것은 시료내에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 구하는 과정이다.

-Bovine serum albumin BSA: 우리말로 하면 소 혈청 알부민이라고 한다. 분자량은 약 66.4kDa 정도 되는 단백질로써 대부분의 동물에 많이 존재하는 단백질이다. 대부분의 단백질이 그러하듯 분자량이 매우 큰 화합물이라 구조식은 매우 복잡하고 보통 3D structure로 전체적인 모양을 보여지게 한다. BSA의 용도로는 생화학, 생무락에서 세포배양시에 세포의 영양분으로써 첨가해주는 경우도 있고, 또한 단백질의 정량에서 검량곡선을 얻기 위한 표준물로도 많이 쓰이며 제한효소를 사용할 때 적은양의 효소(단백질)을 사용해야 하므로 용액 내의 단백질 농도를 보완해주기 위하여 첨가하기도 한다. 단백질 정량에서 검량곡선을 얻기 위한 표준물질로써 사용하는 것은 BSA가 적합하다. 다른 일반적인 검량곡선법에서 표준물질을 사용하여 곡선을 구하듯이 BSA도 단백질 정량의 하나의 기준이 되기에 적합한 것이다. 하지만 BSA만 사용하는 것은 아니다. BSA는 생체 내에 많아 다른 물질에 비하면 가격이 저렴한 축에 속한다는 점도 있다.

-비색법에 의한 순단백질 정량: 실험중에 우리는 단백질 용액 속에 들어있는 미량의 단백질을 정량할 필요가 있다. 앞에서 설명한 방법에 의해서는 미량의 단백질을 정량하기가 어렵기 때문에 비색법을 이용한다.

참고 자료

농촌진흥청 국립식량과학원 홈페이지 순단백질의 정량(비색법)