PROTEIN PURIFICATION

소개글

본 실험에서는 일상생활에서 흔하게 접할 수 있는 물질 속에 어떤 종류의 단백질이 어느 정도의 농도로 포함되어있는지 알아보고자 한다. 번데기 Sample을 Homogenizer를 이용해 분쇄하고 Ammonium sulfate를 이용하여 염의 농도를 높여 단백질을 침전시키는 방법인 Salting Out을 한 후 원심분리기에 Centrifugation하여 얻은 pallet을 dialysis를 하고 다시 한 번 centrifugation을 통해 supernatant를 얻는다. 그 후 Cation Exchange Chromatography를 거쳐 각 과정마다의 sample을 얻었고 이들을 Spectrophotometer를 통해 각 sample의 absorbance를 측정해 최종적으로 단백질의 농도를 측정하고자 하였다. 끝으로 각 sample을 전기 영동하여 번데기에 포함되어 있는 단백질들의 분자량을 알았으며 단백질의 종류까지도 예측해 봄으로써 번데기 속에 다량 포함되어 있는 단백질들의 특성이 나타나 번데기를 섭취함으로 인해 우리 몸에 어떤 영향을 미치는 가에 대해 알 수 있었다.

목차

Ⅰ. Introduction

Ⅱ. Materials and Methods
1. Chromatography 전처리
2. Chromatography
3. Concentration gradient mix
4. Electrophoresis

Ⅲ. Results

본문내용

PROTEIN PURIFICATION
- 번데기의 단백질 추출 및 분석 -
Abstract - 본 실험에서는 일상생활에서 흔하게 접할 수 있는 물질 속에 어떤 종류의 단백질이 어느 정도의 농도로 포함되어있는지 알아보고자 한다. 번데기 Sample을 Homogenizer를 이용해 분쇄하고 Ammonium sulfate를 이용하여 염의 농도를 높여 단백질을 침전시키는 방법인 Salting Out을 한 후 원심분리기에 Centrifugation하여 얻은 pallet을 dialysis를 하고 다시 한 번 centrifugation을 통해 supernatant를 얻는다. 그 후 Cation Exchange Chromatography를 거쳐 각 과정마다의 sample을 얻었고 이들을 Spectrophotometer를 통해 각 sample의 absorbance를 측정해 최종적으로 단백질의 농도를 측정하고자 하였다. 끝으로 각 sample을 전기 영동하여 번데기에 포함되어 있는 단백질들의 분자량을 알았으며 단백질의 종류까지도 예측해 봄으로써 번데기 속에 다량 포함되어 있는 단백질들의 특성이 나타나 번데기를 섭취함으로 인해 우리 몸에 어떤 영향을 미치는 가에 대해 알 수 있었다.
Ⅰ. Introduction
일상생활에서 흔히 접할 수 있는 물질에 속한 단백질을 Column Chromatography를 통해 특정 단백질의 농도를 측정하고 전기영동을 통해 단백질을 분리 하여 물질이 가진 단백질에 대해 알아보고자한다.
Ⅱ. Materials and Methods
시약

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참고 자료

없음