plasmid 분리, 전기영동

목차

가) 실험이론과 원칙 (서론)
나) 실험재료와 방법
다) 실험결과
라) 고찰과 결론

본문내용

1. 실험목적 : E.coli로부터 recombinant DNA technology에 이용되는 plasmid를 miniprep으로 소량 분리한다. 분리해낸 plasmid를 각각 다른 제한효소로 끊어 각 제한효소의 restriction map을 그린다.

2. plamid : plasmid는 세균의 세포 복제되어 독자적으로 증식할 수 있는 염색체 이외의 DNA 분자로 고리모양을 띤다. plasmid는 다른 종의 세포 내로 전달될 수 있는데, 유전자재조합 기술은 이 성질을 이용하여 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 잘라 유전자를 삽입하여 다시 세균에 넣어 배양하는 기술이다.

3. plasmid miniprep : miniprep이란 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법이다. 여러 가지 방법 중에서 alkali lysis method가 흔히 사용되는 방법인데, 기본적인 원리는 세균의 세포벽과 세포막을 부수고 DNA만을 분리해 내는 것이다. 여기서 가장 중요한 것은 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 구분하여 분리하는 것이다. 둘 다 DNA로 성질이 비슷하여 분리하기 쉽지 않지만 chromosomal DNA는 분리과정에서 linear 형태가 되고 상당히 커서 가라앉게 되는 점을 이용한다. chromosomal DNA는 대부분 침전의 형태로 제거될 수 있으며, 이 방법을 통해 plasmid DNA를 얻을 수 있다.

참고 자료

없음