[A+레포트]생명과학실험1 - Plasmid DNA 추출과 전기영동

최초 등록일
2020.10.09
최종 저작일
2020.06
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"[A+레포트]생명과학실험1 - Plasmid DNA 추출과 전기영동"에 대한 내용입니다.

목차

1. 개념 및 원리
1) 플라스미드 DNA
2) Alkaline lysis
3) 아가로즈 젤 전기영동

2. 실험재료

3. 실험방법

4. 실험결과
1) 전기영동하여 얻은 결과를 찍어 부착하세요.
2) 마커와 비교하여 추출된 plasmid DNA가 어떤 것인지 사진에 표시하고 그 이유를 간략하게 적어보세요.
3) 만약 여러 개의 밴드가 관찰된다면 그 이유가 무엇일지 적어보세요.

5. 토의
1) 수업 중 알게 된 중요한 내용
2) 결과에 대한 해석
3) 수업 중 발생한 의문점
4) 기타 개인적인 견해

본문내용

1. 개념 및 원리
1) 플라스미드 DNA
플라스미드는 대표적인 에피솜 DNA 분자이다.
Circular double stranded DNA이다. 세포 내에 염색체 외에 독자적인 복제가 가능한 유전물질을 가지고 있는 것이다. 세균에서 많이 발견된다.
플라스미드는 세균에서 다른 숙주세포로 이동이 가능하며 유전자 재조합을 하여 유전자공학에 자주 사용된다.
① 종류
-생식성 플라스미드(F plasmid): 세균의 접합에 필요한 유전자를 가지며 IS 서열이 있어 숙주 염색체에 삽입될 수 있다. tra operon이 존재한다.
-저항성 플라스미드(R plasmind): 항생제나 독에 내성을 가지는 유전자를 내포하고 있다. 항생제에 내성이 있는 플라스미드를 가진 세균만 자연선택 되는데 발전하여 한 세균이 다양한 저항성 유전자를 갖고 있는 슈퍼박테리아가 탄생하게 된다.
-Col 플라스미드: bacteriocin인 colicin 유전자를 가지고 있어 다른 세균을 죽일 수 있다.
-분해성 플라스미드: 특정 물질을 분해할 수 있는 단백질을 암호화하는 유전자를 갖고 있다.
-Virulence 플라스미드: 숙주에 피해를 주는 독소를 생산하는 유전자를 가진다. 병원성을 가진다.

<중 략>

5. 토의
1) 수업 중 알게 된 중요한 내용
플라스미드는 우리가 아는 동그란 원형 말고도 linear이나 뭉쳐진 super coil 형태로 발견될 수 있다. 특히 super coil 형태로 가장 많이 발견된다.
가장 흔히 사용하는 Alkaline lysis를 통해 세포에서 플라스미드 DNA만 추출해 낼 수 있다. 추출한 플라스미드를 표적 유전자와 함께 같은 제한효소로 자른 후 DNA 연결 효소로 재조합 DNA를 생성한다. 이후 숙주 세포에 넣은 뒤 삽입된 숙주세포만 골라 클로닝을 시킨다.
전기영동을 할 때에는 인산기가 -를 띄기 때문에 -쪽에 DNA를 넣어주어야 +방향으로 이동을 한다.

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