SDS-PAGE

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미지 분자량 측정 단백질 전기영동으로 단백질 분리

본문내용

단백질 전기영동으로 단백질 분리
미지 분자량 측정

<중 략>

SDS의 기능
SDS는 단백질 내의 소수성 부분에 결합하여 단백질 분자간의 소수성 결합의 가능성을 억제

SDS는 또한 단백질에 많은 음전하를 제공하며, 단백질 내에서의 하전된 반응기들의 영향을 크게 감소

2) Tris-buffer
버퍼내에서 각 물질의 charge에는 차이가 생김

정지상에서 이동상의 분자량과 전하량의 차이에 따라 물질의 이동속도가 차이가 생김

3) Ammonium persulfate(APS)

자유 반응기를 생성하여 acrylamide와 bisacrylamide의 polymer를 형성하는 개시제

증류수로 30%(W/v) 저장용액을 만들어 여과하고 작은 부피로 나눈후 4℃에 보관

시간이 지남에 따라 서서히 분해되므로 1~3주가 지나면 새로 만들어 사용해야함

4) TEMED
ammonium persulfate(APS)로부터 생기는 자유 반응기(free radical)의 생성을 촉진하는 촉진제

acrylamide와 bisacrylamide의 polymer형성을 촉진

TEMED는 자유염일 때에만 작용하므로 낮은 pH에서는 polymer형성을 방해

참고 자료

http://blog .naver.com/nanomate
http://kin.naver.com
대한 생화학․분자 생물학회(1999):단백질 전기영동
전기영동 (원리 및 영동 Pattern 해석)
단백질 실험노트, 상 : 추출, 분리 및 재조합 단 백질의 발현/김승호, 장규태 역/ 월드사이언스/2006

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