[보고서]GC를 이용한 Lipid 분석

소개글

가스크로마토그패피 분석 실험으로 보고서입니다.

목차

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본문내용

3. <실험방법>
• 식용유에다가 25㎖ 메탄올과 1㎖ 황산을 혼합 -> 황산은 가수분해 촉매, 메탄올은 methylation
메탄올은 극성이 강하고 메틸화시켜서 지방산이 핵산으로 넣어간다.
• 4㎖ vial에 50㎎의 건조 시료를 넣고 위 용액 1.5㎖을 가한다.
• 10㎕ BHT (50㎎/㎖ MeOH)와 10㎕ Margaric acid (10㎎/㎖ hexane)을 가하고 마개를 닫는다.
BHT는 산화방지제이고 margaric acid는 standard로 사용한다.
• Heating block을 이용하여 100℃에서 1시간 30분동이 가열한다. (methylation)
※ 실험을 하러 갔을 때는 위에 과정까지는 미리 하여졌다. 이유는 시간이 너무 오래 걸리기 때문...
• 실온으로 식힌 후 1.5㎖ hexane을 가하고 혼합을 한다.
Hexane은 비극성이고, 메탄올은 극성이다.
• 정치하여 용액층을 분리시킨 후 상층액(hexane)을 받아낸다.
• 2㎖ ddw을 가하고 혼합시킨다.
• 정치하여 용액층은 분리시킨 후 상층액(hexane)을 받아낸다.
Hexane은 비극성, 지방산이고 물은 극성, Glycerol 이다.
• 약간의 Sodium Sulfate를 가하여서 물을 제거한다.
• 1㎕를 GC에 injection 시킨다.

4. GC 분석
Injector : Split injection, 220℃, Split ratio =1/50
Column: SP2330 (비극성), 170℃ 2분 -> 220℃까지 3C/min로 상승
검출기: FID (280℃)

참고 자료

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