[원핵 생물 실험] SDS-PAGE

목차

◇실험의 목적◇
◇실험 방법◇
◇실험의 원리◇
◇결과 및 토의◇

본문내용

◇실험의 목적◇
Electrophoresis의 한 방법인 SDS-PAGE를 통해 지난 주 Transformation을 해서 얻은
E. coli 를 Protein purification 한다.

◇실험방법◇
1) Cell Culture 3㎖ OD(600) 0.6
2) IPTG 3㎕ 첨가 (농도=50㎎/㎖)
3) 2hr incubation
4) Cell harvest
5) Resuspend, T D W 300㎕로 농축
6) Somication
7) Centrifuge ---> i)super ratent
ii)pellet , T D W 300㎕에 녹인다.
I) + ii)에 dye 를 섞어준다.
8) 100 10min
9) In ice
10) Centrifution
12) Coomassie blue첨가
13) Electrophoresis

참고 자료

-Lodish, Baltimore, Berk, Zipursky, Matsudaira, Darnell, Molecular Cell Biology, Third edition(1995), Scientific American Books, NewYork
-Edited by E.L.V. Harris and S. Angal, Protein purification methods : a practical approach Oxford ; New York : IRL Press at Oxford University Press, c1989.
-http://www.mcb.uct.ac.za/sdspage.html