[생화학실험] A+, 세포파쇄 및 단백질 정량법 실험

소개글

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A+ 받았던 레포트입니다.

목차

1. 실험목적
2. 이론
3. 실험재료 및 기기
4. 실험과정
5. 실험결과
6. 고찰
7. Reference

본문내용

1. 실험목적
- 동·식물 또는 박테리아 세포막 구조와 그에 적절한 파쇄 방법에 대해 이해한다.
- 단백질 구조를 알고 추출 방법을 이해한다.
- 다양한 세포의 적절한 파쇄 방법과 단백질 추출 방법 및 정량법을 습득한다.

2. 이론
◼ 세포막 구조
- 동·식물(진핵세포) : 원형질막으로 단백질과 인지질로 구성되며, 인지질 이중막을 형성하고 있다.
- 박테리아(원핵세포) : 진핵생물의 원형질막과 비슷하며, 이는 인지질로 구성된 이중막과 이중막의 표면
또는 내부에 붙어있는 단백질로 구성되어 있다.

◼ 단백질
- 단백질은 온도나 pH와 같은 여러 인자에 의해 영향을 받으며, 이는 단백질의 구조 파괴 및 기능 상실
을 초래한다.

◼ 세포 파쇄
- 시료 조직으로부터 세포막을 파쇄하여 세포 내 단백질 및 대사체를 변형 없이 안정하게 추출하면 분
리 및 동정이 가능하다.
- 적절한 세포 파쇄 방법을 선정하기 위하여 샘플위 유형, 분리하고자 하는 물질, 필요 수율, 분리한 물
질로부터 이후의 실험, 샘플의 수량, 예산 등을 고려하여야 한다.

1) 세포 파쇄 방법

① 초음파 파쇄법 (sonication)
○ 원리
- 기기 장치의 탐침을 통해 고주파 전기에너지를 일정한 진폭을 가진 기계적인 진동으로 변환
→ 탐침은 초당 최소 20.000번 이상의 일정한 진폭을 가진 진동을 발생시켜 세포막을 파쇄
→ 과도하게 높은 진동으로 인해 시료 용액 내에 기포가 발생하게 되며, 이는 단백질의 산화를
유도하여 변성을 일으켜 세포막을 파쇄한다.

참고 자료

최준혁, 박종락, 정상화. (개최날짜). Sonication을 이용한 OD에 따른 Dunaliella salina 세포막 파쇄. 한국기계가공학회 춘추계학술대회 논문집
배명권 et al.,Cell Disruption of Microalgae by Low-Frequency Non-Focused Ultrasound, 한국기계가공학회 춘추계학술대회 논문집, 제 19권 2호, 2020, 111-118
C.-H. Park, Essentials of Biochemical Engineering, Chong Moon Gak, 2007, ISBN 978-89-92592
김선영 et al., Recovery of Astaxanthin from microalgae Using Simple and Energy-efficient Method, 한국화학공학회, 56권 3호, 2018, 376-380
Smith, P.K., et al, Measurement of Protein Using Bicinchoninic Acid, 1985, biochem 76~86pag
권혁빈 외 8인, “일반생물학실험”, 유한문화사, 2001, p.124-p.128
박상권 외 7명, “화공생물단위조작실험 1”, 2021-1, 52-54