생명과학실험 - Western Blot

소개글

연세대학교 미래캠퍼스 2019년 생명과학실험 레포트입니다.
본 내용은 2019년에 시행된 실험을 기준으로 작성되었기 때문에
절대적인 자료가 아니며, 오로지 참고용으로만 사용해주시기 바랍니다.
실험 Results 자료는 실험조교 및 상황에 따라 언제든지 달라질 수 있기 때문에
공백으로 남겨두었으며, 이에 유의하시고 차질없이 사용하시길 부탁드리겠습니다.

목차

1. Title
2. Date
3. Purpose
4. Introduction
5. Materials & Methods
6. Results
7. Discussion
8. Reference

본문내용

3. Purpose : SDS-PAGE를 통해 혼합물 속의 단백질들을 크기별로 분류하고 Membrane으로 옮기는 과정을 거친 뒤, 1차와 2차 항체를 붙여줌으로서, 특정 단백질의 존재여부와 대략적인 양을 알 수 있다.

4. Introduction : Western Blot이란, 생체 용액에 있는 개개의 단백질 성분을 분리하는데 쓰이는 기술 중 하나로, 여러 단백질이 섞여 있는 세포 혹은 조직의 추출물로부터 전기영동 시켜 크기별로 분류하고 항원-항체 반응을 이용하여 특정단백질만을 Detection하는 것을 원리로 한다.

5. Materials & Methods
(1) Sample이 되는 세포를 준비하여 lysis buffer를 통해 cell lysis를 발생시키고 protein을 추출한 뒤, protein assay를 실시하여 단백질을 정량한다.
(2) SDS-PAGE를 통해 folding된 단백질을 선형구조로 풀어주어 denaturation시킨다.

참고 자료

한국분자생물학회 편 / 1997 / 분자생물학 / 아카데미 서적 / 1판 / p.15~18
Thiemen, Palladino / 2012 / 최신 생명공학의 이해 / 바이오 사이언스 / 2판 / p.112~116, p.192~194
김승호, 장규태 / 2006 / 단백질 실험노트(하) / 월드 사이언스 / 3판 / p.17~51