Western Blot 정의 및 실험방법

소개글

"Western Blot 정의 및 실험방법"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. Introduction

Ⅱ. Materials & Method
1. Materials
2. Method
1) <젤 만들기>
2) <단백질 준비>
3) <단백질 전기영동>
4) <단백질 transfer>
5) <Blocking>
6) 1차 항체반응
7) 2차 항체반응

Reference

본문내용

실험 목적 : Western blot으로 여러가지 섞인 단백질 중에서 특정 단백질을 찾아낼 수 있다.
Western blot이란 분자생물학에서 다양하게 사용되는 분석 기술로, 특정한 단백질을 찾기 위해서 사용된다. 특정 단백질의 유무 또는 양을 알기 위해 수행하는 분석방법이다. 주로 단백질의 발현 여부를 알기 위해 사용한다. 단백질을 크기 별로 분리할 수 있고, 항원-항체 반응을 이용한다. 단백질을 SDS, urea 또는 2-mercaproethanol과 같은 환원제로 용해시킨 후 SDS-polyacrylamide gel 전기영동 후 coomassie brilliant blue로 염색하여 전기 영동으로 분리된 단백질의 band를 확인하거나 membrane에 옮기는 것을 Western Blot이라고 한다. 단백질이 옮겨진 membrane에서 항원-항체 반응을 이용하여 특정 항체에 대한 항원(단백질)을 찾아내는 방법이다. 이때 사용하는 항체는 항원에 대해 특이하게 반응하는 물질을 방사성 동위원소로 표지하여 사용하거나 특정효소 혹은 형광을 나타내는 색소를 결합시킨 물질을 이용하여 적은 양의 단백질을 눈에 보이게 할 수 있다.

참고 자료

en.wikipedia.org/wiki/Western_blot
http://blog.naver.com/withcoffee67/70155445176
https://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%9B%A8%EC%8A%A4%ED%84%B4_%EB%B8%94%EB%9E%8F