DNA mini-prep

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고급생물과학실험 레포트입니다.
< DNA mini-prep >

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이번 실험은 alkaline lysis method를 이용하여 E.coli의 plasmid를 분리하는 실험이었다. plasmid의 prep은 뽑는 양에 따라 많이 뽑을때는 largeprep, 적게 뽑을 경우에는 miniprep이라고 하는데 각각에 따라 사용하는 방법이 다르다고 한다. 우리는 적은 양의 plasmid를 분리했기 때문에 miniprep에 해당하고, miniprep의 방법에는 alkaline lysis miniprep, boling miniprep, lithium miniprep 등이 있는데 우리는 그 중에서 alkaline lysis method를 이용했다. alkaline lysis method는 박테리아의 세포막을 SDS같은 ionic detergent로 깨고, alkali 용액인 NaOH를 이용해 DNA를 denaturation시킨 후, acidic 용액으로 plasmid DNA만을 선택적으로 renatruation시켜 분리하는 방법이다.

참고 자료

-CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY, WILEY.
-http://www.dongeui.ac.kr/%7Ecblee/lec07/bio07.html
-http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_20.php
-http://bioscience.igh.cnrs.fr/1999/v4/d/actis/fulltext.htm
-http://www.life.uiuc.edu/micro/316/topics/plasmids/plasmid-repln.html

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