[생화학레포트] plasmid mini-prep 1

목차

1. 서론

2. 재료 및 방법
2.1. 실험 재료
2.1.1. 사용한 cell 및 배양조건
2.2. 실험 방법
2.2.1. Plasmid mini-prep 및 농도 측정
2.2.2. Restriction enzymes
2.2.3. Agarose gel electrophoresis

3. 결과
3.1. Plasmid DNA concentration measurement
3.2. Agarose gel electrophoresis

4. 고찰
4.1. 버퍼에 관한 고찰의 전제
4.2. Plasmid mini-prep 및 농도 측정
4.3. Restriction enzymes
4.4. Agarose gel electrophoresis

5. 참고문헌

본문내용

재조합 DNA 기술(Cohen et al., 1973)의 개발이후, 원핵 또는 진핵 숙주에서 그들이 자연적으로 expression하지 않는 이질적 유전자를 표현하는 것이 가능해졌다. 이 기술의 개발로 고 부가가치의 재조합 단백질을 생산하는 것이 가능해졌다. 이러한 발전은 고부가가치 재조합 단백질이 점점 더 중요해짐에 따라 생물 약제와 산업용 효소 응용이 증대된 모든 종류의 제품의 생산을 가능하게 했다. 지금까지 FDA(식품의약청)와 EMEA(유럽의약청)는 150개 이상의 재조합 단백질의 적용을 제약으로 사용할 수 있도록 허가했다(Ferrer-Miralles et al., 2009). 오늘날 생물 약제 판매량은 70-80억 달러에 이를 것으로 추정된다(Walsh, 2010년).
이러한 재조합 DNA 기술에서 흔히 사용되어지는 것이 재조합 Plasmid이다. Plasmid는 다양한 박테리아와 몇몇 진핵생물에서 발견될 수 있는 extrachromosomal double-stranded circular DNA 분자이다. 재조합되지 않은 원래의 형태에서 플라스미드의 크기는 1에서 200 kbp 사이이다.

참고 자료

Hendrik Waegeman and Marjan De Mey, Increasing Recombinant Protein Production in E. coli by an Alternative Method to Reduce Acetate, 2012.01.20.
Chapter 10. Recombinant DNA technology, ELTE, http://elte.prompt.hu/sites/default/files/tananyagok/IntroductionToPracticalBiochemistry/ch10s02.html.
NanoHelix, <Plasmid DNA 분리 원리와 방법>
Why do restriction enzymes of bacteria not cut their own DNA? Why can it cut plasmids in genetic engineering, which are also part of the bacterial cell?, Quara, https://www.quora.com/Why-do-restriction-enzymes-of-bacteria-not-cut-their-own-DNA-Why-can-it-cut-plasmids-in-genetic-engineering-which-are-also-part-of-the-bacterial-cell
Dr. Michael Blaber, Nitrogenous bases, nucleosides, nucleotides, polynucleotides.　
Top Tip Bio, What Percentage Agarose Is Required For Electrophoresis?