미생물 균주의 보관

소개글

미생물의 종류와 대상에 따른 보관법.

목차

I.균주보관법
1.계대배양 보존법(periodic transfer)
2.동결건조법의 절차와 구체적 방법
3. 건조
1)Annear 방법
2)NCIB 방법
3)IFO방법
4)Sordelli방법

본문내용

I.균주보관법
1.계대배양 보존법(periodic transfer)
균주를 적당한 배지에 배양한 후에 저온 또는 실온에서 보관하고 일정기간이 지난 후 신선한 배지로 이식하여 배양하고 다시 보관하는 보존법이다.
보존에 특별한 장치나 기구를 필요로 하지 않기 때문에 쉽게 이용할 수 있고 비용이 저렴하여 재생 또한 쉽다. 그러나 잦은 배양으로 인하여 균주의 유전적 특성이 변하기 쉽고, 오염의 가능성이 있으며, 많은 노동력이 필요하기 때문에 많은 미생물자원을 장기간 보존하는 미생물자원센터의 경우에는 거의 사용하지 않는다. 계대배양의 보존시간은 곰팡이에 따라 다양하며 일반적으로 1~12개월로 알려져 있다.


2.동결건조법
동결건조법에 있어서는 미리 세포를 동결하여 수분의 이동을 억제하여 진공하에서 대부분의 수분을 승화시킨 후 나머지 얼지 않은 수분을 증발시켜 수분을 제거하는 방법이다. 세포는 휴지상태에 도달할 때까지 저온, 탈수 등의 과정을 거치게 되어 일부가 사멸하거나 종류에 따라 장애를 받게 되는데 이를 피할 수는 없다. 그래서 이러한 손실을 최소화하기 위해 적당한 보호물질을 첨가하여 실시한다.

1)장치요소
동결장치는 크게 나누어 (1) 시료부분 (2) 수분 포집부분 (3) 진공장치의 3부분으로 되어있다. (1)의 시료부에는 두 가지 형이 있어 (2)의 수분 포집부에 연결된 도관에 앰플을 하나 하나 장착하는 다기부(manifold)식과 다수의 앰플을 내압용기 내에서 건조하는 chamber식으로 구분한다. 수분포집은 cold trap 또는 건조제(P2O5, CaSO4 등)를 사용하여 행한다. 진공펌프에는 회전식 진공펌프(도달진공도 1∼10μHg)와 유확산식 진공펌프(도달진공도 0.1∼ 0.01μHg)가 있다.

2) 분산매
분산매는 보통 고분자 물질과 저분자 물질을 섞어서 만든다. 고분자 물질 또는 이를 함유하는 것으로는 혈청, skim milk, 전분, dextran, polyvinylpyrrolidone(PVP) 등이며 저분자 물질로는 dextrose, sucrose, 유당, meso-inositol 당이나 glutamic acid - Na 등의 아미노산이 이용된다.

참고 자료

1.http://imsnu.snu.ac.kr (microbial resource center)
2.환경미생물학, 박재림 이상준 손홍주 공저, 2003년