[생화학실험]단백질 농축

소개글

이 자료는 단백질 농축에 관한 것입니다..

목차

▣ 단백질 농축
♣ Ammonium Sulfate Precipitation ("Salting Out")
♣ Freeze dry

본문내용

▣ 단백질 농축
♣ Ammonium Sulfate Precipitation ("Salting Out")
고농도의 염 용액 속에서는 Protein은 뭉쳐서 침전하는 경향이 있다. 이러한 기술을 "Salting Out"(Salting out effect - Protein은 구조상 hydrophobic한 부분은 분자의 내부에 위치하고 hydrophilic한 부분은 분자의 밖에 위치하여 물과 결합되어 안정을 유지한다. 여기서 우리는 cell extraction에서 얻어진 protein mixture로부터 우리가 원하는 protein을 빼내고자 하는데 이때 사용되는 것이 salt를 이용한 salting-out effect이다.
salt의 ionic strength는 각 이온의 농도에 비례하므로 salt를 많이 넣으면 용액의 ionic strength가 증가한다. 그러면 용액은 protein과 같은 marcro molecule을 solvation하는 capacity가 감소하고, marcro molecule들 간의 effective electrostatic shielding을 감소시키는 결과를 낳는다. 결론적으로 말하자면 salt의 양이 많아 질 수록 protein은 침전이 되는 것이다. 이때 Salt의 농도에 따라 각기 다른 protein이 침전하기 때문에 salting out은 protein을 정제하는 동안 종종 사용되는 것이다. pH, temperature, protein purity 등의 요인들은 특정 단백질의 salting out point를 측정하는데 중요한 역할을 한다.) 이라 한다. 각각의 가른 농도에서 각각의 단백질이 다르게 침전하는 특성을 이용해 단백질 정제에 이용되곤 한다. 각각의 단백질에 침전에 있어서 pH, 온도, 순도는 아주 중요한 역할을 한다
Ammonium Sulfate는 염의 종류로 침출 효과, pH의 다양성, 고도의 용해성, 용액의 저열, 저가 등과 같은 많은 유용한 특성들과 연관되어 있기 때문이다
Ammonium Sulfate의 농도는 일반적으로 포화된 양의 퍼센트로 나타내고 ammonium sulfate의 간단한 gram식은 X0%에서 시작한 용액의 양과 X%를 구할 필요가 있다. 식은 다음과 같다.

참고 자료

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