예비리포트- 전기영동-Agarose Electrophoresis,

소개글

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목차

▪Tittle :
1.전기영동-Agarose Electrophoresis
▪배경과 이론
▸Agarose gel
▸전기영동 buffer
▸전기영동의 이동속도
▸DNA size marker
▸Gel loading dye
▪Agarose gel 전기영 동법
▪Material
▪Method

2. Etbr
▪내용

3.DNA 정량원리
▪내용

▪참고문헌

본문내용

Tittle : 전기영동-Agarose Electrophoresis

?배경과 이론 : DNA나 단백질의 크기에 따라 분획하기 위한 방법의 하나가 전기영동이다. DNA와 단백질은 전하를 띠고 있기 때문에 전기를 걸어주면 각 분자의 전기적 특성에 따라 전장을 이동하게 된다. DNA의 경우에는 음전하를 띠기 때문에 전장에서 양극(+)쪽으로 이동한다. 단백질은 아미노산 조성에 따라 각각의 전기적 특성이 다를 수 있기 때문에 시약을 처리하여 전체적으로 음전하를 띠도록 먼저 처리한 후 전기영동을 실시한다. 이렇게 하면 DNA와 마찬가지로 음극(+)에서 양극(-)으로 이동하게 된다. DNA나 단백질이 전장을 이동하는 속도에 가장 큰 영향을 주는 것은 분자량이다. 즉, DNA나 단백질의 무게가 가벼울수록 같은 시간 내에 멀리 이동할 수 있다. 따라서 DNA나 단백질이 출발 지점으로부터 얼마나 이동했는지 거리에 따라 이들의 크기를 계산해낼 수 있다.
?Agarose gel : Agarose gel은 해상도가 다소 떨어지지만 100bp에서부터 50kb까지 비교적 큰 폭의 DNA단편(fragment)을 분리할 수 있으며, 사용이 간편하고, 다루기 쉬워서 가장 널리 사용되는 전기영동 재료이다. 주로 DNA 전기영동에 많이 사용된다. 더 작은 크기의 DNA 분리를 위해서는 농도 높은 Agarose gel이나 Metaphor와 같은 특수한 Agarose gel, 혹은 polyacrylamide gel을 사용한다.

?전기영동 buffer : 전기장에서의 이동성은 완충용액(buffer)의 이온 강도와 조성에 영향을 받는다. 이온 강도가 너무 낮으면 DNA 이동이 느려지고, 이온 강도가 높으면 열이 발생하여 심한 경우 gel이 녹거나 DNA의 구조가 변하게 된다. 실험실에서 많이 사용하는 buffer는 TAE와 TBE이다. 보통은 농축용액을 만들어 상온에서 보관하면서 필요할 때마다 희석하여 사용한다.

참고 자료

없음