단백질 분리 정제

소개글

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목차

서 론

본 론

1. 분리정제의 원리
1) 단백질의 정제
2) 추출 및 가용화
3) 염석 및 유기용매에 의한 침전
4) 투석
5) 칼럼크로마토그래피
6) 이온교환크로마토그래피
7) 흡착 칼럼크로마토그래피
8) 겔 여과크로마토그래피(분자체)
9) 친화 크로마토그래피
10) 전기영동
11) 원심분리법 (centrifugation)

2. 단백질 정제의 목적과 고려 사항
1) 가능한 최고의 회수율
2) 최고의 생물학적 활성유지
3) 최고의 순도

3. 아미노산 서열 결정방법
1) C-말단 결정법
2) N-말단 결정법

4. 단백질의 생화학적 특성
1) 용해도
2) 단백질의 등전점
3) 단백질의 변성

5. 아미노산과 단백질의 분석
1) Ninhydrin 반응
2) Kjeldahl법
3) Biuret법
4) Phenol 시약법
5) 자외선 흡수 spectrum을 이용하는 방법

결 론

본문내용

3) 염석 및 유기용매에 의한 침전
염석은 물에 잘 용해하는 염(황산암모늄 등)을 단백질혼합액에 가하여 이온강도를 증가시켜 단백질을 침전시키는 것이다. 만약 목적으로 하는 단백질이 황산암모늄 60% 포화 때 주로 침전하는 것을 알면 미리 60% 포화 이하의 황산암모늄 농도로 목적 이외의 단백질을 침전시켜 제거하고 다음에 60% 포화가 되도록 황산암모늄을 가하여 목적하는 단백질을 침전시키고 이것을 원심분리로 모은다. 염석 조작은 정제의 초기 수단으로 흔히 이용된다.
유기용매에 의한 침전은 에탄올, 아세톤 등 물과 잘 혼합하는 유기용매를 단백질용액에 가해 용액의 비유전율을 변화시켜 단백질을 침전시키는 것이다. 유기용매의 농도에 따라 침전되는 단백질의 종류가 다르므로 염석의 경우와 마찬가지로 목적으로 하는 단백질을 다량으로 함유하는 침전구분을 모아 다음 정제단계로 넘긴다.

참고 자료

1. 생화학, 김명순·김종화 외 11인, 형설출판사, 1999.
2. 생화학 (상), 채범석 역, 서울외국서적, 1996
3. http://myungsung.net/board/way-board
4. http://blog.naver.com/hwanzzang
5. 화학공학포럼 http://www.cheric.org/board/view
6. 화학공학 livery http://blog.naver.com/etty0915