4주차_minipreparation

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목차

1. 실험목적
2. 실험 결과
3. Discussion
4. Further study
5. Reference

본문내용

① Miniprep
② 실험 목적
e.coli에 transformation한 plasmid를 minipreparation 방법을 통해 transformed plasmid DNA를 분리하고 DNA를 정량하여 결과를 확인한다.
③ 실험 결과
-DNA 농도: 0.2322 µg/µl
④ Discussion
-각 solution의 function은 다음과 같다.
Solution Ⅰ Glucose는 osmotic pressure를 유지해 세포가 터지지 않도록 한다. Tris-Cl은 buffer로서 pH를 안정적으로 유지하는 역할을 한다. DNA는 pH에 민감하기 때문에, Tris-Cl이 안정적인 pH를 유지함으로써 DNA가 손상되지 않도록 한다. EDTA는 Ca, Mg와 같은 2가 양이온과 결합하는 chelating reagent이다.

참고 자료

Jeremy M. Berg, John L. Tymoczko, Gregory J. Gatto Jr., Lubert Stryer (2015). Biochemistry. W. H. Freeman. p72-73, p116
Joe Sambrook (2001). Molecular Cloning_ A Laboratory Manual-Cold Spring Harbor Laboratory Press, pg 1.32-1.34 (chapter1/protocol 1)
Bitesize Bio | How Alkaline lysis works | https://bitesizebio.com/180/the-basics-how-alkaline-lysis-works/
QIAGEN | Key Steps in Plasmid Purification Protocols | https://www.qiagen.com/us/knowledge-and-support/knowledge-hub/technology-and-research/plasmid-resource-center/key-steps-in-plasmid-purification-protocols
https://toptipbio.com/the-nanodrop-results-explained/
http://www.afrontier.net/laboratory/product/item2.php?it_id=1586324500
https://www.zymoresearch.com/blogs/blog/how-to-increase-plasmid-yield