[식품생화학실험] DNS에 의한 환원당의 정량시험(Reducing Sugar Quantitative test by DNS)

목차

Ⅰ. 실험목적
Ⅱ. 실험원리
Ⅲ. 시약 및 기구
Ⅳ. 실험방법
Ⅴ. 실험결과
Ⅵ. 토의(Discussion)
Ⅶ. 참고문헌

본문내용

Ⅰ. 실험목적
1.1. DNS법을 이용하여 환원당의 정량을 알아본다.
1.2. 각 포도당용액의 농도와 흡광도를 측정하여 standard-curve를 그려본다.
1.3. 정량시험에 대해 이해하고, 표준곡선을 이용하여 미지농도의 포도당 용액의 농도를 알아본다.
1.4. 희석한 꿀과 식혜의의 흡광도와 농도를 알아본다.

Ⅱ. 실험원리
가. DNS법
DNS 환원당 정량 방법은 환원당(reducing sugar)을 DNS(3,5-dinitrosalicylic acid)와 Rochelle 염으로 발색하여 흡광도를 측정하는 환원당 정량법이다. 이 방법은 조작이 간편하면서도 저렴하게 원하는 결과를 얻을 수 있어 널리 사용되고 있다. 당류에 케톤기(C=O)가 있으면 환원력이 나타난다. 이러한 환원력을 이용하여 발색시약인 DNS를 알칼리 조건에서 환원시키면 이 DNS는 3-amino-5-nitrosalicylic acid로 환원되면서 540 ~ 575 nm 범위의 빛을 흡수하여 된다. 이렇게 발색되는 정도는 시료에 존재하는 환원당과 정량적으로 비례하며 분광광도계를 이용하여 발색되는 정도를 흡광도로서 측정하여 정량분석을 할 수 있게 되는 것이다. DNS는 환원당을 측정하는데 사용하는 시약이며 설탕자체는 비환원당으로 환원당이 아니라 DNS로 측정을 할 수 없으나 이 설탕이 가수분해되면 포도당, 과당 따위가 생성된다고 한다. 즉, 탄수화물은 단당류, 이당류, 다당류로 나뉘며 단당류와 이당류 중 알데히드기(R-CHO)와 케톤기(R-CO-R')의 존재에 따라 환원성이 있는 환원당과 환원성이 없는 비환원당으로 나누어진다. 환원당은 반응성 있는 알데히드기, 케톤기를 갖고 금속염 알칼리용액을 환원시키는 성질이 있는 당의 총칭이다. 포도당(glucose), 과당(fructose), 맥아당(maltose), 유당(lactose), 갈락토스(galactose) 등이 포함된다.

참고 자료

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